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液相色譜工作原理

儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內(nèi), 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù), 在兩相中作相對運動時, 經(jīng)過反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。

液相色譜儀應(yīng)用范圍

它的應(yīng)用范圍比較大，而且有不斷拓展的趨勢。制備純化樣品是它的基礎(chǔ)功能，通過色譜分離，樣品中目標物質(zhì)被分離出來有待進一步研究，比如分離水樣中有機物、食品中以備分析等。然后是天然成分研究，有助于中藥學的發(fā)展。分析前人留下的珍貴藥典，通過藥性研究造福人類。提高產(chǎn)品質(zhì)量，以提高它的價值和效用，比如純化藥品、純化蛋白質(zhì)制品等。還有一個方向是用于產(chǎn)品合成的研究，通過獲得一些純度較高的化合物將以促進合成實驗的進行。

液相色譜的操作步驟

1).首先對流動相進行過濾，根據(jù)需要選擇不同的濾膜，一般為有機系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。

2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

3).正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機相沖凈為止)。

4).一般情況下，流動相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩(wěn)定，重要的是儀器基線走后，方可進樣測試。

5).同時進兩針標樣，將其結(jié)果相比較，其結(jié)果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進行樣品的測試了。

6).樣品測試結(jié)束后，就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機相進行保護，否則，有損色譜柱。

7).關(guān)機時，先關(guān)計算機，再關(guān)液相色譜。

8).填寫登記本，由負責人簽字。