北京高效液相色譜方法承諾守信「創新通恒」

HPLC對流動相的一般要求

流動相就比如人體的血液，其質量直接影響到整個系統的正常運行與否。

© 應該使用HPLC級的溶劑，不能互相混溶的溶劑不可以直接切換！

© 注意溶劑的截止波長。截止波長是指該溶劑可以在紫外檢測器中使用的很低波長,低于該波長后,溶劑會有很強的紫外吸收，從而影響極限的穩定性、干擾對所分析物質的檢測。

© HPLC所使用的水必須是新鮮的和經過0.45μm濾膜過濾過的。建議每天更換新鮮的水。長期不用時，必須把使用水的管路用有機的溶劑置換，防止長霉。

© 儀器使用完后要采用適當的溶劑沖洗等方法維護色譜柱和系統。如果使用了緩沖鹽一定先將鹽要沖洗干凈。

© 當有流路堵塞時，可以嘗試將之反接后沖洗。污染的溶劑或溶劑瓶里的藻類生長將會縮短溶劑過濾器的使用壽命，并且影響泵和系統的的性能。這在水溶劑或磷酸鹽緩沖液(pH 4 至7) 中尤其如此。

高效液相空白色譜柱出峰的原因？

【分析原因】1.確定檢測波長，如果是末端吸收，排除三氟乙酸的干擾。

2.使用100%乙腈作為流動相，乙腈作為樣品進樣，如果為基線，則說明色譜柱及系統完好。

3.然后在換流動相為10%乙腈和90%三氟乙酸水，樣品為乙腈，如果有上述“中間位置出現較大的色譜峰”，那說明八成問題在三氟乙酸上，或者稀釋三氟乙酸的水上。

4.如果上述2、3都有“中間位置出現較大的色譜峰”，檢查檢測器及進樣器。

5.這些還不能解決，請聯系工程師

高效液相色譜儀-色譜峰的雙峰問題

長期使用后的色譜柱，如果有雜質進入，就會使色譜柱入口處的固定相“板結”并在流動相所產生的高壓作用下，形成柱頭的塌陷，被分析的樣品組分的正常色譜峰就變成了雙峰，這時可按下述方法來修復色譜柱。首先將柱頭的緊固螺母旋下，這時就會發現柱頭內的固定相已被壓縮進去了，嚴重時可縮進10mm以上。在這種情況下，我們可用針尖將流動相表層板結變黃的部分摳掉，并以相同的固定相將此塌陷區填平、壓實，再將色譜柱的緊固螺絲上緊，修復工作即告結束。用經過修復后的色譜柱再做樣品時，色譜峰就恢復正常了。

液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么？

①篩板堵塞或柱失效，解決辦法是反向沖洗柱子，替換篩板或更換柱子。

②存在干擾峰，解決辦法為使用較長的柱子，改換流動相或更換選擇性好的柱子

③可能柱超載，減少進樣量。

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