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發布時間:2021-08-03 09:47  





等溫核酸試劑盒
主要有:
核酸提取純化類1.磁珠法核酸提取試劑盒
2.磁珠法提取DNA試劑盒
3.DNA提取試劑盒(離心柱法)
4.磁珠法RNA提取試劑盒
5.RNA提取試劑盒(離心柱法)
6.磁珠法植物基因組DNA提取試劑盒
7.反轉錄試劑盒
8.膠回收試劑盒
9.PCR純化試劑盒
10.病毒核酸提取試劑盒(磁珠法)
11.土壤基因組DNA提取試劑盒
12.法醫樣本DNA提取試劑盒(磁珠法)等
試劑盒
英國TwistDx Inc公司開發的重組酶聚合酶擴增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)--被稱為是可以替代PCR的核酸檢測技術,目前新的等溫擴增檢測技術。以此為基礎的TwistAmp? 核酸擴增產品,能夠在15分鐘內進行常溫下的單分子核酸檢測。該技術對硬件設備的要求很低,特別適合用于體外診斷、獸醫、食品安全、生物防御和農業等領域。常規PCR必須經過變性、退火、延伸三個步驟,而PCR儀本質上就是一個控制溫度升降的設備。RPA反應的適宜溫度在37°C - 42°C之間,無需變性,在常溫下即可進行。這無疑能大大加快PCR的速度。此外,由于不需要溫控設備,RPA可以真正實現便攜式的快速核酸檢測。據介紹,RPA檢測的靈敏度很高,能夠將痕量的核酸(尤其是DNA)模板擴增到可以檢出的水平,從單個模板分子得到大約1012擴增產物。而且RPA還用不著復雜的樣品處理,適用于無法提取核酸的實地檢測。RPA不僅可以對擴增產物進行終點檢測,還可以對擴增過程進行實時監控,甚至可以通過試紙條(側流層析試紙條LFD)讀取結果。
目前,TwistAmp? 試劑盒的擴增子長度在500bp以內。不過,經過特別優化的RPA擴增,也可以生成更長的擴增產物,或者減慢擴增速度(便于定量),甚至在更低的溫度下進行反應。
如何提高擴增曲線的可重復性?
優化擴增曲線考慮以下因素: 對于低拷貝數模板,不穩定擴增可能是因為達到檢測限或者是反應混勻程度不同(未混勻的反應擴增效率不佳)。另外,在低溫情況下存貯,重組酶和輔助蛋白在50%甘油情況下形成沉淀,也是可能導致不穩定擴增的原因。所以,20x核心反應mix在室溫下解凍并震蕩渦旋將使其成為液體,不影響其功能,并且有效提高擴增效率。不穩定擴增也可能是因為master mix量不足,在加入體系前,用戶必須保證震蕩后20x核心反應組分均一。