選擇合適的GAPDH抗體需要注意哪些規則

在Western Bloting實驗中，可能存在總蛋白濃度測定不準確，或者蛋白質樣品在電泳前上樣時產生的樣品間的操作誤差；這些誤差可以通過測定每個樣品中實際轉到膜上的內參，比如內參GAPDH的含量來進行校正。GAPDH（甘油醛-3-磷酸脫氫酶）是參與糖酵解的一種關鍵酶，由4個30-40kDa的亞基組成，分子量146kDa，檢測條帶大約在36kDa。 GAPDH基因幾乎在所有組織中都高水平表達，廣泛用作Western blot蛋白質標準化的內參。

如何選擇合適的GAPDH抗體？

內參抗體雖然選擇較多，但是也需要遵循一定的原則，并契合實際的應用要求。首先，我們需要考慮目的蛋白的大小，我們推薦內參要與檢測的目的蛋白的分 子量最好相差5KD以上，因此你需要根據你目的檢測蛋白的分子量來選擇合適的內參，由于GAPDH的檢測分子量大約在36kD，因此該內參抗體不是很適合用于檢測30kD-40kD大小目標蛋白的WB實驗中。另外，不同的組織來源的樣本在選擇內參時還有一定的區別。比如某些細胞中，由于組織缺氧、糖尿病等因素會導致GAPDH的表達增高，不適合做內參。

因為檢測的目的蛋白分子量在50kD左右，之前的β-Tubulin不是很適合，就購買了一支Abbkine的GAPDH抗體做內參，效價確實有點驚訝，我用1:1000倍起始稀釋覺得條帶很濃，后來一直到1:8000稀釋，同時減少了曝光時間，條帶仍然很清晰。——武漢大學生命科學院一客戶

產品名稱及描述	品牌	貨號	產品說明
Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)	Abbkine	A01020	詳情
HRP Conjugated Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)	Abbkine	A01025	詳情

一般來說，內參抗體可檢測的種屬類型越多，在使用過程中的選擇余地就越大；而小鼠源的單克隆抗體一般在特異性、穩定性以及效價都要優于多克隆抗體。 另外，抗體的效價也是考察該抗體性價比的重要方面，也即相當于實際應用時的稀釋比率。一個效價高的100μl GAPDH抗體（假如其WB檢測的稀釋比率是1:5000，最終使用液相當于500ml），要比效價低的1ml的GAPDH抗體（假如 WB檢測的稀釋比率是 1:200，最終使用液相當于2ml）性價比更高。因此在選擇抗體的時候，不但需要考慮抗體的量，還需要考慮抗體的效價，即不同應用的建議稀釋比率。

為什么選擇推薦Abbkine品牌的GAPDH抗體？

供應GAPDH抗體的進口品牌有很多，像Abcam、Santa Cruz、Cell Signaling（CST）、Millipore等都有相關GAPDH抗體提供。但是由于不是專門的標簽和內參抗體供應商，因此在性價比上不是最優的選擇， 以Abcam為例，其一支100μl GAPDH抗體的RMB報價為￥4418；CST的一支100μl GAPDH抗體的報價是￥2997。

另外，一些國內的供貨商也能提供分裝的GAPDH抗體，但是在品牌和質量保障上都有不足。國產分裝的GAPDH體在質量穩定性上有不足，并且經過分裝以后，其效價也有損失。而原產于國內實驗室的GAPDH抗體有些具有較好的檢測活性，但是在應用類型上有差距，并且在批次之間的穩定性上較難控制，而國內僅有的少量原產抗體也是多克隆抗體。如果您想買到一支性價比更高，同時也是原裝進口品牌的GAPDH內參抗體，那 Abbkine可能會是您的一個重要考慮選項之一。我們向您推薦Abbkine的GAPHD單克隆內參抗體Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)（貨 號A01020）。

產品名稱及描述	品牌	貨號	產品說明
Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)	Abbkine	A01020	詳情
HRP Conjugated Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)	Abbkine	A01025	詳情

該抗體單克隆抗體，克隆號為2B5。其抗原為同時具有蛋白特異性和種屬通用性的GAPDH蛋白部分序列，其檢測種屬非常的廣泛，可識別人、小鼠、兔、大鼠、猴、狗、雞、豬和綿羊的GAPDH蛋白，也算是一個真正保守的內參抗體。另外，該抗體的效價非常高，WB實驗推薦稀釋比率為 1:1000-1:10,000，甚至有客戶報告更高的稀釋比率。

Abbkine還提供大包裝1ml的GAPDH內參抗體，非常適合經常進行內參驗證或校準，或者進行細胞骨架熒 光定位的免疫學實驗需求。為方便客戶 的使用， 上述產品，Abbkine均在中國備有現貨。Abbkine針對中國市場，提供全球化的產品質量追蹤和售后服務以及保障，如果您在使用過程中有任何問題， 請直接與其當地代理商艾美捷科技有限公司聯系。

產品名稱及描述	品牌	貨號	產品說明
Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)	Abbkine	A01020	詳情
HRP Conjugated Anti-GAPDH Monoclonal Antibody (2B5)	Abbkine	A01025	詳情

Abbkine品牌是一家提供高性價比免疫學和細胞學科研產品及解決方案的品牌，艾美捷將其引入中國，作為其中國區域代理，將為客戶提供最具性 價比的常規免疫學試劑，如各種標簽抗體、內參抗體、常規一抗以及全系列二抗，抗體檢測底物以及相關試劑盒等。同時我們作為多家國際知名品牌的的中國代理或 區域代理，艾美捷能為您提供系列的實驗室解決方案。如果您對上述產品感興趣，請致電免費客戶專線400-6800-868到艾美捷科技有限公司垂詢相關的產品信息及完整實驗解決方案。