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發布時間:2021-01-11 13:30  





Tris生物緩沖劑;用于凝膠電泳配置緩沖液。作為堿性,用于酸的糾正,且不會引起二氧化碳潴留增加。每次7.28%THAM 2-3ml/kg(等滲液為3.64%),以等量5%-10%葡萄糖液稀釋后緩慢滴入。臨床常用英文縮寫為THAM。用于生物化學和分子生物學實驗中的緩沖液的制備;;用于表面活性劑、硫化促進劑的制備;制備含Tris結構單元的水溶性高分子作為涂料分散劑;室內甲醛吸附材料的制備等。
一旦確定了緩沖液的pH值,就需要選擇使用什么樣的緩沖體系。首先是在選擇緩沖體系時要確保選擇的緩沖體系在你設定的pH值上確實具有緩沖能力。選擇的緩沖體系,其解離常數pKa值應該在設定的pH上下一個pH值單位內。
再者是確保你使用的緩沖液濃度足夠高以達到實際緩沖溶液的作用,正常一般選擇的濃度是20~100mM。需要記住的是你所使用的緩沖體系不應該影響蛋白活性!例如,磷酸鹽會抑制激酶的活性,所以反應前應徹底地透析掉。
總的來說,TCEP是這三個還原劑中穩定的,但它也是昂貴的。我通常在純化過程的緩沖液中添加DTT,在后保存酶液的緩沖液中添加TCEP。一般比較合理的還原劑濃度是5~10mM。基本上你要確保還原劑濃度要遠遠高于你的蛋白濃度。因為DTT和巰在室溫下就會降解,所以需要將添加了還原劑的緩沖液處于低溫保藏,或者在使用時再添加還原劑。