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低溫生物菌種的影響因素有哪些

菌的質量：保藏的菌種應培養在營養豐富的條件下，使之進入穩定期，稍老一些的菌體對環境抵抗力強。另處，作為冷凍干燥的菌懸液細胞濃度要高不同的菌對冷凍干燥的耐受程度不同，如果保存的菌液細胞濃度不高，就會使以后傳種造成困難，保存期也會受到影響。

保護劑：不同種類的保護劑對不同微生物的作用是不同的，如個別菌種在脫脂乳作保護劑的情況下失敗率高達99.99%，而采用葡聚糖等混和保護劑時失敗率大大減少。一般情況下，那些容易保存的菌種對保護劑的要求不很嚴格，而不易保存的菌種對保護劑的要求卻很苛刻。因此，選擇好的保護劑是冷凍干燥保存菌種的關鍵因素。

干燥速度：實驗表明，慢速干燥比快速干燥存活率高，如青霉菌6h干燥存活率為67.3%，而3h為59%。

空氣的影響：冷凍干燥后空氣對細菌細胞影響較大，可導致細胞損傷進而失敗，故在凍干后應立即在真空下融封，才有利于長期保存。

溫度的影響：在干燥和真空狀況下溫度的影響遠沒有上述幾項因素重要，因此可以在室溫下保存，但許多微生物在4℃保存的存活率要比在室溫下高1倍。

含水量的影響：水分含量過高對菌存活不利，完全脫水也不利于保存，一般把干燥后的細胞含水量控制在3%以下(1%-3%)

生物有機肥產品生產菌種使用現狀

細菌類生產用菌種除常見的芽孢外， 還出現了高地芽孢菌、 類干酪乳菌、 屎腸球菌、 鹽居固氮菌等新菌種， 其中， 高地芽孢菌和鹽居固氮菌普遍存在于土壤環境中， 未見致病性報道， 屬風險一級； 類干酪乳菌又名為副干酪乳菌， 雖為風險一級 ， 但有從動物受傷部位分離到該菌的報道；屎腸球菌屬于乳酸菌類，屬風險二級， 建議謹慎使用。伯克霍爾德氏菌是一些具有生物防治、 促進植物生長和生物修復等功能的細菌， 但同時也是可以引起鼻疽、 類鼻疽病的致病菌， 因此真菌伯克霍爾德氏菌屬于風險三級， 需做致病性試驗， 建議慎用或不用。真菌類生產用菌株主要為絲狀真菌和酵母菌。哈茨木霉、 米曲霉、 淡紫紫孢菌、 長枝木霉、 綠色木霉、 棘孢木霉、 黑曲霉、 粉紅螺旋聚孢霉、 金龜子綠僵菌等屬于生物安全風險等級二級， 需按照NY/T 1109－2017 《微生物肥料生物安全通用技術準則》 進行毒理學測試。酵母菌主要以釀酒酵母為主， 還有少量東方伊薩酵母、杰丁塞伯林德納氏酵母 （原產朊假絲酵母、 杰丁畢赤酵母）、 膜醭畢赤酵母、 解脂耶羅威亞酵母等， 屬于生物安全風險等級一級， 可免做毒理學試驗。

                                                                什么是低溫生物菌種的保藏？

將需要保藏的菌種，接種在適宜的斜面培養基上，菌絲長滿斜面時，用硫酸紙包扎棉塞或者硅膠塞，放置在4℃的冰箱中保藏，叫做斜面（菌種）低溫保藏法。由于微生物的新陳代謝活動未停止，試管內培養基易失水變干。因此，保藏時間較短，不適于長期保藏。每隔3～6個月應轉管一次。草菇菌種不耐低溫，需保藏在10～12℃之間。或在草菇菌落上灌注3～4毫升的防凍劑（10%的甘油）。當菌絲長滿斜面后，在無菌條件下，用無菌橡皮塞代替棉塞，并用石蠟密封，即可在室溫或冰箱中保藏。這種方法可防止雜菌污染，隔絕氧氣，避免培養基干燥，使用方便。據測定，保藏3年的菌種生活力仍很旺盛。