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              發(fā)布時(shí)間:2021-01-12 15:08  








              工業(yè)合成:三羥本身由于結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,以中心碳原子呈四面體結(jié)構(gòu),含三個(gè)羥和一個(gè)氨基,可以進(jìn)行多種取代和氧化還原反應(yīng),是一種化工合成原料。緩沖劑TAPS的一種合成方法就是利用Tris和1,3-丙磺酸內(nèi)酯在醇中合成的。通常要采購(gòu)用于工業(yè)合成的Tris原料對(duì)試劑純度要求不高,重點(diǎn)是量大,找產(chǎn)能較大的原料生產(chǎn)廠家是比較劃算的。




              使用緩沖溶液的注意事項(xiàng):不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分,如,氨-氯化銨中的氨酷酸-中的醋酸。現(xiàn)在,不少實(shí)驗(yàn)室引入了定量加液器,用定量加液器加試劑,具有簡(jiǎn)便準(zhǔn)確誤差恒定的特點(diǎn),特別是在做成批樣品時(shí)更顯出它的優(yōu)越性,不少同志也喜歡用它來加緩沖液,但是,應(yīng)注意緩沖液不能長(zhǎng)久存放在定量加液器中,因該器皿不密閉,易造成氨的揮發(fā)(醋酸-緩沖液中的醋酸也同理),從而,導(dǎo)致溶液失效,正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制,使用后及時(shí)密閉并置于低溫中保存。




               此外,一些緩沖體系對(duì)溫度非常敏感,例如Tris-HCl緩沖液,如果你在25℃時(shí)將緩沖體系調(diào)至pH值8,pH值將在5℃時(shí)增加到8.58而在37℃時(shí)降到7.71。所以,如果打算在4℃條件下保存蛋白或在37℃進(jìn)行實(shí)驗(yàn),就應(yīng)該考慮到室溫下調(diào)的pH值可能在實(shí)驗(yàn)條件中就不適用了。  其他類型的色譜分離柱,如凝膠過濾柱和Ni2 親和層析柱,可能需要更高的鹽濃度。我一般用高達(dá)500 mM NaCl進(jìn)行高鹽淋洗,以防止蛋白和柱之間的非特異性結(jié)合。


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