ＤＮＡ污染去除-武漢友名生物

DNA連接酶與DNA聚合酶的區別？

形成方式不同

DNA連接酶是在兩個DNA部分片段之間形成磷酸二酯鍵，ＤＮＡ污染去除，不是在單個核苷酸與DNA部分片段之間形成磷酸二酯鍵。DNA連接酶都不能催化兩條游離的DNA鏈相連接。

DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的DNA1片段上，形成磷酸二酯鍵。dna聚合酶起到催化劑的作用，催化原來的dna進行復1制，然后將原來的dna和復1制以后的dna進行模板配對后，連接聚合在一起，就可以形成新的dna鏈。

cDNA是指具有與某RNA鏈呈互補堿基序列的DNA。與RNA鏈互補的單鏈DNA，以其RNA為模板，在適當引物的存在下，由依賴RNA的DNA聚合酶（反轉錄酶）作用而合成，并且在合成單鏈cDNA后，再用堿處理除去與其對應的RNA以后，以單鏈cDNA為模板，由依賴DNA的DNA聚合酶或依賴RNA的DNA聚合酶作用合成雙鏈cDNA。在這種情況下，mRNA的cDNA，與原來的基因組DNA相同而且無內含子；相反地，對應于在原來基因中沒有的而在mRNA存在的3"末端的poly A序列等的核苷序列上，與外顯子序列、先導序列以及后續序列等一起反映出mRNA結構。
置換合成法。該方法利用鏈在反轉錄酶作用下產生的DNA RNA雜交鏈不用堿變性，而是在dNTP存在下。利用RNA酶H在雜交鏈的mRNA鏈上造成切口和缺口。從而產生一系列RNA引物，使之成為合成第二鏈的引物。在大腸DNA聚合酶工的作用下合成第二鏈。該反應有3個主要優點：①非常有效；②直接利用鏈反應產物，無須進一步處理和純化；③不必使用S1核酸酶來切割雙鏈cDNA中的單鏈發夾環。




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