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發(fā)布時(shí)間:2021-07-01 05:00  





ELISA試劑盒的成分
1 預(yù)包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T
2 酶標(biāo)記: (30倍濃縮)HRP標(biāo)記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1
3 標(biāo)準(zhǔn)品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2
4 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1
5 標(biāo)記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1
6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1
7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1
8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實(shí)驗(yàn)所需器材(但試劑盒沒有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標(biāo)紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標(biāo)記和顯色劑)
ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項(xiàng)
ELISA實(shí)驗(yàn)通用規(guī)則
Elisa試劑盒技術(shù)原理
(1). 抗原或的固相化及抗原或的酶標(biāo)記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面a的抗原或仍保持其活性。
(3). 酶標(biāo)記的抗原或既保留其活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復(fù)性好。以反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的有效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。
Elisa試劑盒有哪些需要注意的?
1. 跟著病況的進(jìn)展或由其他因素影響,某些在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)作大幅動(dòng)搖,因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理。間接法測定中,標(biāo)本恰當(dāng)稀釋還可下降非特異性反響。
2. 加樣一般運(yùn)用加液器,在ELISA試劑盒中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加間斷液。加標(biāo)本時(shí)有必要每份標(biāo)本運(yùn)用一支移液器吸嘴,避免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和間斷液時(shí)則不需更換吸嘴。
3.在成批手藝檢測中,還應(yīng)留神操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原反響和酶促反響時(shí)間不一致,對(duì)競爭法及定量檢測影響很大,不留神可能會(huì)導(dǎo)致過錯(cuò)效果或定量不準(zhǔn)。