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發布時間:2021-07-31 19:52  






你對制備色譜陌生嗎?還不進來看看它的特點
很多初接觸色譜領域的朋友對制備色譜這個名詞比較陌生。其實,在化學化工醫學等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是較為典型的制備色譜,換句話說,將分析色譜的進樣量增大,同時得出大量的所需物質(餾分)的過程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質。而制備色譜系統則是利用制備色譜的思想能得到純化物質的多個分析測試設備聯用的總稱。 分析色譜是制備色譜的基礎。當我們在分析色譜上取得了良好的分離效果時,可以將其放大,應用到制備色譜上,由此,我們需要考慮調整上樣量,流速,梯度:
1.上樣量的調整: 他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長和柱內徑有關:
具體關系時;制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長/分析柱長*制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;
2.流速的調整:
制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長/分析柱長制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;
3.梯度的調整:
制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速;
液相色譜儀
根據應用方向可以分為制備、半制備、分析等類型,使用前兩種的應用都是為了制備樣品,而后一種則是為了分析樣品,做定性定量實驗。它們在原理上相同,卻也有著各自的區別,現在對前兩類液相色譜儀進行比較。
都是制備型儀器,制備、半制備液相色譜儀針對的樣品量和分離速度不同,半制備分離純化的樣品量少,由于泵的壓力和流速會低一些,分離效率會相對低一些。但它在純化小樣和分離微量元素方面有很大用途。制備型儀器可以用在生產中,比如食品原料中農殘去處,藥品生產中去除無效成分或有毒成分等。半制備型儀器更多用在實驗中,它經常和全自動固相萃取儀搭配使用來更大程度純化樣品。由于泵的功率不同,儀器中各個部分的尺寸和材質也略有不同,半制備型儀器中各部分需要承受的壓力較小,處理樣品量少,所以從色譜柱到管道、閥門等通量都較小,而制備型儀器就要大一些以應對較大量的樣品進入。操作方面基本一致,除了尺寸外沒有什么其它實質區別。
半制備液相色譜儀的分類
1、按固定相和流動相的極性大小可分:正相半制備液相色譜儀和反相半制備液相色譜儀。
2、按分離對象的屬性可分:有機物半制備液相色譜儀和無機物半制備液相色譜儀。
3、按產地可分:國產半制備液相色譜儀和進口半制備液相色譜儀。
4、按分離規模可分:小型半制備液相色譜儀和大型半制備液相色譜儀。
5、按梯度數目可分:兩元梯度半制備液相色譜儀、三元梯度半制備液相色譜儀和四元梯度半制備液相色譜儀等。
6、按用途可分:生物半制備液相色譜儀、制藥半制備液相色譜儀、化工半制備液相色譜儀、食品半制備液相色譜儀、氨基酸半制備液相色譜儀和維生素半制備液相色譜儀等。
20世紀初在俄國的波蘭植物化學家茨維特(Twseet)首先將植物提取物放入裝有碳酸鈣的玻璃管中,植物提取液由于在碳酸鈣中的流速不同分布不同,因此在玻璃管中呈現出不同的顏色,這樣就可以對各種不同的植物提取液進行有效的成分分離。
1941年,馬丁與辛格用一根裝滿硅膠微粒的色譜柱,完成了乙酰化氨基的分離,開啟了液色譜技術,因此獲得諾貝爾化學獎。1949年,馬丁建立了色譜保留值與熱力學常數之間的關系,奠定了物化色譜的基礎;1952年,馬丁與辛格又創立了氣液色譜法,分離了脂肪酸與脂肪胺。1966年之前科學家所做的努力,為傳統經典液相色譜奠定了基礎。
而液相色譜儀的鼻祖則是由斯坦因與莫爾于1958年設計的氨基酸分析儀,這種儀器能夠分蛋白質水解的產物。首臺商用LC則是由沃特斯公司制造。
1971年之后,液相色譜技術得到了飛速的發展,HPLC的分析體制也逐步完善。到了二十世紀八十年代中期,液相色譜技術已經非常非常成熟,激動人心的新發展日趨減少,人們開始轉向相關領域發展,如超臨界色譜、毛管電泳色譜、制備色譜等。