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進樣器的維護給樣機可分為手動和自動兩種，盡管它們的工作方式不同，但其使用要點基本相同。自動進樣器常見的問題是交叉污染，造成交叉污染的原因非常直接，樣品在進樣針的內外表面都殘留著樣品，然后再進入色譜系統。要解決交叉污染，主要靠清潔。2、操作精細，手動進樣器的操作要領大致相同，應使用液相色譜 LC進樣針，進樣時要插到針頭，不使用時要將針頭留在進樣器內，在使用前后要及時清洗。

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色譜柱維護化合物分離的關鍵是色譜柱。維護好的色譜柱具有很高的塔板數量，儀器基線穩定。1、避免壓力、溫度急劇變化和機械振動。氣溫驟降或使色譜柱從高處落下，都會影響柱內填充狀態；柱壓突然升高或降低，也會對柱內填充物產生沖力，所以在調節流速時要緩慢進行，在閥進樣時閥的轉動不能過緩(如前面所述)。2、溶劑的組成應逐漸改變，尤其是反相色譜，不能直接由改為全水，反之亦然。3、色譜柱反沖，納譜分析小分子分離液相色譜柱 ChromCore系列和 EcoPak系列色譜柱進行反沖；納譜分析的手性色譜柱 UniChiral系列色譜柱可以反沖、反沖去除留在柱頭的雜質。而納譜分析生物大分子液相色譜柱 BioCore系列色譜柱不能反沖，否則反沖會迅速降低柱效。4、為避免破壞固定相，選擇合適的流動相(特別是 pH)。有時候，一預柱可以在進樣器前連接，分析柱是硅膠粘合時，預柱為硅膠，可使流動相在進入分析柱前先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質溶解。

泵用后不能及時清洗移動相中不得含有腐蝕性物質，含有緩沖液的流動相不能留在泵中，特別是當泵停泵過夜或更久時。若含有緩沖液的流動相留在泵中，可能會析出鹽的微晶，如上述固體顆粒那樣損壞密封環和柱塞，甚至只是因為溶液處于靜止狀態時，會析出。所以，必須用純水將泵完全清洗干凈，然后轉換成適合于保存色譜柱和有利于泵維護的溶劑(對于反相鍵合硅膠固定相，可能是或-水)流相去空水泵工作時要注意防止溶劑瓶內的流動相被用完，否則泵運轉也會磨損柱塞、氣缸或密封環，終造成泄漏。如果沒有流動相的外流，沒有壓力指示怎么辦？也許是泵內有大量的氣體，此時可開啟泄壓閥，使泵在較大流量(如5 ml/min)下運轉，排出氣泡，也可用一個50 ml的針筒在泵出口協助抽氣。另外一個可能的原因是密封環磨損需要更換。

不穩定的壓力和流量其原因可能是需要排除的氣泡；或單向閥內有異物，可卸下單向閥，浸入內超聲清洗。有時候可以是砂濾棒內部出現氣泡，或者被細小鹽粒或滋生微生物部分堵塞，此時，可卸下砂濾棒浸入流動相超聲除氣泡，或將砂濾棒浸入稀酸(如4 mol/L)中迅速除去微生物，或將鹽溶解，再立即清洗。為什么壓力太大還是太低？也許是管道堵塞了，需要清理清理。另一種可能是由于管道出現了泄漏。檢驗阻塞或泄漏時，應逐段進行。采用梯度洗脫時，由于多種溶劑混和，組分不斷變化，產生了一些特殊問題，必須引起足夠的重視。PS:(在液相色譜中對成分復雜的樣品，采用梯度洗脫法。在同一分析周期內，不停地改變流動相的濃度比例，稱為梯度洗脫。這樣，在一個復雜樣品中，性質差異較大的組分，就能達到各自合適的容量因子 k的分離效果。

坡度洗脫的流動相選擇不當要注意溶劑的溶解性，不相容性溶劑不能作為梯度洗脫的流動相。部分溶劑混溶于一定比例，超過一定范圍后就不能互溶，使用時更要注意。同時，在與緩沖溶液混合時，也會發生與緩沖劑混合，在使用過程中需要特別注意。不計空白梯度洗脫為保證良好的重復性，梯度洗脫的溶劑純度要求較高。由于弱溶劑中的雜質在色譜柱上被強溶劑洗脫，在分析樣品之前，必須對樣品進行空白梯度洗脫，識別溶劑雜質峰。分級洗脫溶劑需要完全脫氣，以防止在混合過程中產生氣泡。沒有考慮溶劑混合引起的粘度變化由于混合溶劑的粘度隨組分而變化，因此，在梯度洗脫過程中常常會發生壓力變化。比如，和水的粘度都比較小，當它們以相似比例混合時，粘度增加很大，這時的柱壓比或水為流動相時大一倍。所以在梯度洗脫時要注意防止壓力超過輸液泵或色譜柱可以承受的大壓力。

六通閥的正確使用與維護①樣品進樣前，要用0.45μ的濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。②旋轉閥芯時不要太慢，不要停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內壓力急劇上升，甚至超過了泵的大壓力；再轉到進樣位置，過高的壓力會使柱頭損壞。③為了防止進樣閥內的緩沖鹽及樣品殘留，每次分析結束后應沖洗進樣閥。一般可采用清水沖洗，或先用溶樣溶劑沖洗，再用清水沖洗。

應用過程中的液相色譜四個關鍵因素1、液相色譜儀本身：通常儀器本身是沒有問題的，尤其是新買回來的儀器。就儀器本身而言，重要的是儀器的檢驗，新買回來的儀器一般都是由賣方先對儀器做系統的確認工作(包括 IQ、 PQ、 OQ)，確認順利通過后，再請國家或省級儀器檢定局的來校驗，檢定合格后再用，檢定合格后再用，除此之外，還可以放心使用，此外，還可為儀器的正常使用提供保障。2、色譜條件：通常的色譜條件包括流動相、色譜柱、檢測波長、流速和進樣量。移動相是指在制備流動相所用水和試劑試液時，水的電阻率一般不超過18.2兆歐，而水的電阻率不超過18.2兆歐，其原因是為了防止水和試劑試液中雜質對色譜結果的干擾，測試液采用色譜級別。

③先用溶劑將檢測池沖洗，具體用哪種具體的試樣而定；若沖了還不行，把檢測池卸下來，看燈能量，若能量還可以(有個幾千)，可能得清洗光路。首先還是請工程師來清洗，因為要清理的零件在探測器下面有一個黑色的碎片，中間有一條縫，而且那一塊的螺絲都是八角的，卸起來很麻煩。④拿出5個樣品盤，可以看到里面有一個黑色凸起(看不清是用電筒)，平時進樣針就是從那個地方吸的。伸手就能卸下來，里面有一個小白圈(用多了自然就黑了)，換一個新的就好了，一般只有10個才能買儀器。