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              植物elisa試劑盒電話,默沙克生物科技

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              發(fā)布時間:2020-07-24 05:40  






              武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專門從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。




               三.實驗材料

                 儀器設(shè)備:1.酒精燈、三角燒瓶,培養(yǎng)皿;2.鑷子、剪刀、剖針;3.雙筒解剖顯微鏡;4.光照培養(yǎng)箱或溫室;

                 材料煙1草無菌苗、豌豆幼苗。

                 試劑

                 (1)MS培養(yǎng)基,植物激1素:NAA、6-BA等;

                 (2)飽和漂液(次氯1酸鈉);

                 (3)70%酒精、100%酒精、酒精棉球;

                 (4)無菌水

                 四.實驗步驟

                 豌豆苗的莖尖培養(yǎng)

                 ⑴取發(fā)芽6天的豌豆幼苗10株,簡取1厘米左右的莖尖,浸入70%的酒精中1分鐘,再浸入飽和次氯1酸鈉溶液中消毒15分鐘,(此步以后要求無菌)用無菌水中沖洗5次,在滅菌的濾紙上吸干水分,放入滅菌的培養(yǎng)皿中。






              4)  吸取勻漿液到離心管,4℃ 5000×g 離心5~10min,取上清,-20℃或-80℃保存,避免反復(fù)凍融。

              6、  尿液、唾液等其他液體生物樣本

              1000×g離心20min,取上清即可檢測。

              總的來說,因為ELISA只能檢測可溶性蛋白的含量,所以應(yīng)保證所有樣本均為澄清的液體,沉淀或懸浮物都應(yīng)離心去除。

              為了保證檢測的準確性,保存于-20℃或-80℃的樣本1好在1~6個月內(nèi)檢測;4℃保存的樣本應(yīng)在1周內(nèi)進行檢測。

              另外,還應(yīng)保證樣本不含NaN3,因為NaN3會抑制HRP的活性,從而導(dǎo)致假陰性的結(jié)果。







              假使在被測分子的不同位點上含有多個相同的決定簇,例如HBsAg的a決定簇,也可用針對此決定的同一單抗分別包被固相和制備酶結(jié)合物。展片、貼片打開水浴鍋,使水溫維持在40-45℃,另準備30%乙醇溶液。但在HBsAg的檢測中應(yīng)注意亞型問題,HBsAg有adr、adw、ayr、ayw4個亞型,雖然每種亞型均有相同的a決定簇的反應(yīng)性,這也是用單抗作夾心法應(yīng)注意的問題。

                雙抗1體夾心法測抗原的另一注意點是類風(fēng)1濕因子(RF)的干擾。在2001年修訂的歐洲心臟病學(xué)會心衰診療指南中,已經(jīng)把腦鈉肽作為心衰診斷的工具。RF是一種自身抗1體,多為IgM型,能和多種動物IgG的Fc段結(jié)合。用作雙抗1體夾心法檢測的血1清標本中如含有RF,它可充當抗原成份,同時與固相抗1體和酶標抗1體結(jié)合,表現(xiàn)出假陽性反應(yīng)。采用F(ab')或Fab片段作酶結(jié)合物的試劑,由于去除了Fc段,從而消除RF的干擾。雙抗1體夾心法ELISA試劑是否受RF的影響,已被列為這類試劑的一項考核指標(參見6.2)。

                雙抗1體夾心法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原,但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原,因其不能形成兩位點夾心。



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