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制備型液相色譜儀

制備型液相色譜儀通常都被認為和大容量色譜柱和高流速有關聯的。然而并不是以設備的大小和系統消耗的流動相的多少來決定制備液相色譜，而是依據分離目的來決定。分析液相的目的是給一種組份進行定量和定性。與傳統的純化方法比較，制備液相是一種更有效的分離方法，因此被廣泛應用在樣品和產品的提取和純化上。

液相色譜是近30年發展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術。它既能用于微量組分的分析測定，又能用于大量的制備分離，靈活多樣，其應用范圍已超過其他各種分離方法，尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發揮它的特長，為推動該領域的進步和發展作出了巨大貢獻。

液相色譜的操作步驟

1).首先對流動相進行過濾，根據需要選擇不同的濾膜，一般為有機系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。

2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

3).正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機相沖凈為止)。

4).一般情況下，流動相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩定，重要的是儀器基線走后，方可進樣測試。

5).同時進兩針標樣，將其結果相比較，其結果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進行樣品的測試了。

6).樣品測試結束后，就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機相進行保護，否則，有損色譜柱。

7).關機時，先關計算機，再關液相色譜。

8).填寫登記本，由負責人簽字。

液相色譜的前世今生

早在古代羅馬時期，人們已知道將一滴含有混合色素的溶液滴在一塊布或一片紙上，通過觀察溶液展開產生的同心圓環來分析染料與色素。實際上，這種簡單操作已經采用了現代色譜學的基本原理。

19世紀中葉，德國化學家Runge對古羅馬人的這種方法作了重要的改進，使其具有良好的重現性與定量能力，使鹽溶液可在紙上分離；另外，化學家Goppalsr-oeder也在長條紙上分離了染料和動植物色素，這些研究標志著紙色譜法的建立，并逐步發展成為現代色譜技術。

1903年，俄國植物學家Tswett在華沙自然科學學會生物學會會議上發表了題為“一種新型吸附現象及其在生化分析上的應用”中，提出了應用吸附原理分離植物色素的新方法，這一工作標志著現代色譜學的開始。他將碳酸鈣裝入豎直的玻璃柱中，從頂端倒入植物色素的石油的醚浸取液，進一步采用溶劑沖洗，使溶質在柱的不同部位形成色帶，首先向人們公開展示了采用色譜法提純的植物色素溶液以及色譜圖顯示著彩色環帶的柱管。Tswett將這種方法命名為色譜，管內填充物被稱之為固定相，沖洗劑被稱之為流動相。