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發(fā)布時(shí)間:2021-07-27 16:23  






你對(duì)制備色譜陌生嗎?還不進(jìn)來看看它的特點(diǎn)
很多初接觸色譜領(lǐng)域的朋友對(duì)制備色譜這個(gè)名詞比較陌生。其實(shí),在化學(xué)化工醫(yī)學(xué)等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是較為典型的制備色譜,換句話說,將分析色譜的進(jìn)樣量增大,同時(shí)得出大量的所需物質(zhì)(餾分)的過程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(gè)(或者幾個(gè))純物質(zhì)的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質(zhì)。而制備色譜系統(tǒng)則是利用制備色譜的思想能得到純化物質(zhì)的多個(gè)分析測(cè)試設(shè)備聯(lián)用的總稱。 分析色譜是制備色譜的基礎(chǔ)。當(dāng)我們?cè)诜治錾V上取得了良好的分離效果時(shí),可以將其放大,應(yīng)用到制備色譜上,由此,我們需要考慮調(diào)整上樣量,流速,梯度:
1.上樣量的調(diào)整: 他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長和柱內(nèi)徑有關(guān):
具體關(guān)系時(shí);制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長/分析柱長*制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方;
2.流速的調(diào)整:
制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長/分析柱長制備柱內(nèi)徑的平方/分析柱內(nèi)徑的平方;
3.梯度的調(diào)整:
制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速;
液相色譜的五大系統(tǒng)
1、進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)樣系統(tǒng)分為手動(dòng)進(jìn)樣閥和自動(dòng)進(jìn)樣器。
2、輸液系統(tǒng)輸液泵按輸出液恒定的因素分恒壓泵和恒流泵。對(duì)液相色譜分析來說,輸液泵的流量穩(wěn)定性更為重要,這是因?yàn)榱魉俚淖兓瘯?huì)引起溶質(zhì)的保留值的變化,而保留值是色譜定性的主要依據(jù)之一。因此,恒流泵的應(yīng)用更廣泛。
輸液泵按工作方式分為氣動(dòng)泵和機(jī)械泵兩大類。機(jī)械泵中又有螺旋傳動(dòng)注射泵、單活塞往復(fù)泵、雙活塞往復(fù)泵和往復(fù)式隔膜泵。
3、分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)包括色譜柱、保護(hù)柱以及柱溫箱。
色譜柱:色譜柱是樣品分離的核心。色譜柱在使用前必須仔細(xì)閱讀說明書,了解色譜柱使用的pH值范圍、溶劑耐受范圍、壓力范圍和維護(hù)方法等事項(xiàng)。色譜柱使用完后,需及時(shí)對(duì)色譜柱進(jìn)行沖洗。沖洗完成后,應(yīng)該將色譜柱從儀器上拆下來,兩端用廠家配的堵頭密封后,保存在色譜柱盒里。
保護(hù)柱:保護(hù)柱的作用主要是防止吸附性強(qiáng)的雜質(zhì)對(duì)色譜柱污染,從而延長色譜柱的壽命。針對(duì)不同型號(hào)的色譜柱,應(yīng)選擇相對(duì)應(yīng)填料的保護(hù)柱。應(yīng)注意柱芯也是有壽命的,應(yīng)該定期進(jìn)行更換。
柱溫箱:色譜柱溫度變化,可能會(huì)導(dǎo)致保留時(shí)間的變化。為了避免這個(gè)問題,建議使用柱溫箱。
4、檢測(cè)系統(tǒng)液相色譜常用的檢測(cè)器有紫外檢測(cè)器、示差折光檢測(cè)器和熒光檢測(cè)器三種。
5、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)該系統(tǒng)可對(duì)測(cè)試數(shù)據(jù)進(jìn)行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作,使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。
液相色譜儀的構(gòu)造
液相色譜系統(tǒng)主要由流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器和記錄儀組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對(duì)其流動(dòng)相為液體的特點(diǎn)作出很多調(diào)整。液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩(wěn),進(jìn)樣系統(tǒng)要求進(jìn)樣便利、切換嚴(yán)密。同時(shí),由于液體流動(dòng)相黏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于氣體,為了減低柱壓,液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠(yuǎn)小于氣相色譜柱。
高效液相色譜儀原理
高效液相色譜法的原理是在原始的經(jīng)典色譜法基礎(chǔ)上面引用氣象色譜的理論,把原來的流動(dòng)性改變?yōu)楹芨邏毫蛇_(dá)到4.9′107Pa。色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成。造成的結(jié)果就是色譜柱的柱效遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于原始的經(jīng)典液相色譜。并且它柱子使用后還能具有高度靈敏度檢測(cè)器。能夠?qū)α鞒鰜淼姆治鑫镞M(jìn)行連續(xù)檢測(cè)。
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