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發布時間:2020-10-14 22:42  









電泳設備中電泳的影響因素:
(1)膜的性質:膜過分干燥、出現白斑、彎曲、表面緩沖液過多等都會影響電泳設備中的結果。
(2)緩沖溶液的組成、pH、離子強度和濃度等:緩沖液濃度應準確,濃度太低,區帶泳動速度加快并增加區帶寬度;濃度過高,則使區帶移動速度減慢,造成區帶不易分離。緩沖液使用次數太多、時間過長也可使濃度改變,若膜與緩沖液接觸不良,則影響電泳結果。
(3)電流和電壓:電流太大會影響電泳,高壓電泳時,必須裝備有效的冷卻裝置。
另外,如果樣品量太多、加樣不爭氣、起始位置錯誤也可影響電泳設備的結果。
電泳設備裝置主要包括兩個部分:電源和電泳槽 由于陽極電泳涂裝槽液偏堿性,陰極電泳涂裝槽液偏酸性,因而對設備的要求不同,陰極電泳要求槽、電極、泵、管路等要耐酸;另外,整流設備的要求也不同,陰極電泳設備涂裝電壓較高,一般為100-200V,而陽極一般為50-100V;除此這外烘烤設備也不同,由于陽極電泳烘烤的放氣量較大,就要求烘烤設備有較大的換氣量。
電泳設備槽可以分為水平式和垂直式兩類:
1垂直板式電泳是較為常見的一種,常用于電泳中蛋白質的分離。電泳槽中間是夾在一起的兩塊玻璃板,玻璃板兩邊由塑料條隔開,在玻璃平板中間制備電泳凝膠,凝膠的大小通常是12cm~14 cm,厚度為1mm~2 mm,近年來新研制的電泳槽,膠面更小、更薄,以節省試劑和縮短電泳設備的工作時間。
2水平式電泳設備,凝膠鋪在水平的玻璃或塑料板上,用一薄層濕濾紙連接凝膠和電泳設備緩沖液,或將凝膠直接浸入緩沖液中。制膠時在凝膠溶液中放一個塑料梳子,在膠聚合后移去,形成上樣品的凹槽。


