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              發(fā)布時間:2020-08-07 12:20  






              結合BI生產(chǎn)的基礎培養(yǎng)基,Minimal Essential Medium是基本的培養(yǎng)基, 設計之初是為了培養(yǎng)HeLa細胞以及部分哺乳類的成纖維細胞。MEM含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,適合多種細胞單層生長。以MEM為基礎,Stanner利用Earle'sBalanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)進一步配制成MEM-Alpha培養(yǎng)基,可廣泛用于哺乳動物細胞的培養(yǎng)。




              支原體染預防,俗話說,預防勝于治,所以操作的器材與環(huán)境消毒也至關重要:1.超凈工作臺預防,BI也提供Pharmacidal (貨號: IC-110100)作為相應的處理試劑,Pharmacidal可有效預防真菌(和孢子),細菌(和孢子),支原體和病毒 (包括HIV和Hepatitis B) 的生長和污染。Pharmacidal不需稀釋,每次使用超凈工作臺前或每天噴灑一次臺面,二氧化碳培養(yǎng)箱每兩周一次噴灑消毒,噴灑后讓其自然風干,無需擦拭。





              CFSE是一種可穿透細胞膜的熒光染料,具有細胞膜通透性,能夠自由進入細胞;當CFSE擴散穿過細胞膜,會與細胞內源酯酶產(chǎn)生水解反應而被激發(fā),發(fā)出綠色熒光,這些帶熒光的CFSE會進一步與細胞骨架蛋白結合,形成穩(wěn)定的胞內熒光蛋白。每當細胞進行分裂增殖,胞內熒光蛋白會被平均分配到下一代細胞中,因此細胞熒光強度會隨著增殖代數(shù)增加而不斷地降低,可用流式細胞儀進一步偵測分析得出細胞分裂增殖的情況。CFSE的濃度,對于終判斷細胞增殖結果有直接性的影響!




              細胞培養(yǎng)時可能導致衰老的原因:1.細胞傳代次數(shù)比較多,一定要控制細胞傳代次數(shù)!大量擴增細胞,將細胞進行凍存,在必要的時候重新復蘇。2.胰酶消化時間太長,胰酶消化時間過長容易導致細胞狀態(tài)不佳以及胞質疏松;細胞傳代時需要留意胰酶消化的時間。消化過度,在消化細胞時會對細胞的表面蛋白有較強的損傷,所以消化的時間不能過長,建議使用合適濃度和pH值的消化酶,否則會導致細胞衰老和分化。





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