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              發(fā)布時(shí)間:2020-07-29 00:00  






              武漢默沙克生物????科技有限公司是一家專(zhuān)門(mén)從事生物制劑研發(fā)與生產(chǎn)的企業(yè)。目前可提供各種抗1體、免1疫學(xué)試劑盒、生化試劑、ELISA試劑盒、分子生物學(xué)試劑等多用途多屬種的高品質(zhì)產(chǎn)品,服務(wù)涉及分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免1疫學(xué)等生命科學(xué)領(lǐng)域。在標(biāo)記免疫測(cè)定中,一般加入過(guò)量的標(biāo)記試劑以保證與待測(cè)物徹底反應(yīng)。




              1. 在無(wú)抗1生素的培養(yǎng)基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。

                  2. 分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,或幾個(gè)小培養(yǎng)瓶中。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗1生素加入到每一個(gè)孔中。例如,兩1性霉1素B推薦下列濃度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。

              3. 每天觀測(cè)細(xì)胞毒性指標(biāo),如脫落,出現(xiàn)空泡,匯合度下降和變圓。  

              4. 確定抗1生素毒性水平后,使用低于毒性濃度2~3倍濃度的抗1生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2~3代。



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              NT-proBNP是BNP激1素原分裂后沒(méi)有活性的N-末端片段,與BNP相比,半衰期更長(zhǎng),更穩(wěn)定,其濃度可反映短暫時(shí)間內(nèi)新合成的而不是貯存的BNP釋放,因此更能反映BNP通路的激1活。1血漿NT-proBNP水平隨心衰程度加重而升高。50歲以下的成人血漿NT-proBNP濃度450pg/ml診斷急性心衰的敏感性和特異性分別為93%和95%;50歲以上的人血漿濃度900pg/ml診斷心衰的敏感性和特異性分別為91%和80%。【主要組成成份】底物顯色液A液:檸檬酸,30%H2O2底物顯色液B液(避光保存):EDTA-Na,檸檬酸,甘油,TMB。




              1.3.2 適比例

              在恒定量的抗1體中加入遞增量的抗原形成抗1體復(fù)合物(沉淀)的量見(jiàn)圖1-4。曲線(xiàn)的高峰部分是抗原抗1體比例合適的范圍,稱(chēng)為等價(jià)帶(zone ofequivalence)。在等價(jià)帶前后分別為抗1體過(guò)剩帶和抗原過(guò)剩帶。如果抗原或抗1體極度過(guò)剩,則無(wú)沉淀物形成,在免疫測(cè)定中稱(chēng)為帶現(xiàn)象(zone phenomenon)。(6)脫水必須徹底,否則不易透明,甚至使透明劑內(nèi)出現(xiàn)白色混濁現(xiàn)象5.透明(環(huán)保透明脫蠟液)武漢默沙克純酒精、二甲本等量混合液15min,二甲本Ⅰ60min、Ⅱ30min(至透明為止)。抗1體過(guò)量稱(chēng)為前帶(prezone),抗原地過(guò)量稱(chēng)為后帶(p1ostzone)。在用免疫學(xué)方法測(cè)定抗原時(shí),應(yīng)使反應(yīng)系統(tǒng)中有足夠的抗1體量,否則測(cè)得的量會(huì)小于實(shí)際含量,甚至出現(xiàn)假陰性。





              但是這種特異性也不是絕1對(duì)的。假使兩種化合物有著部分相同的結(jié)構(gòu),在抗原抗1體反應(yīng)中可出現(xiàn)交叉反應(yīng)。洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。例如:絨毛膜促性1腺激1素(hCG)和黃體生成激1素(LH)均由α和β兩個(gè)亞單位組成,其結(jié)構(gòu)的不同處在β亞單位,而兩者的α亞單位是同類(lèi)的。用hCG免疫動(dòng)物所得的抗血1清中含有抗α-hCG和抗β-hCG兩種抗1體,抗α-hCG抗1體將與LH中的

              α酶位發(fā)生交叉反應(yīng)。在臨床檢驗(yàn)中,如用抗hCG抗血1清作為妊1娠診1斷試劑檢定尿液中hCG,只能用于hCG濃度較高的試驗(yàn),否則婦女生理性排泄入尿液中的微量LH將與之發(fā)生交叉反應(yīng)。因此,游離標(biāo)記物與結(jié)合標(biāo)記物的分離是標(biāo)記免疫測(cè)定中的重要步驟。因此在作為早1孕診斷(敏感度應(yīng)達(dá)到50mIu/mlhCG)的實(shí)際中必須應(yīng)用只對(duì)hCG特異的抗β-hCG,以避免與其它激1素的交叉反應(yīng)的發(fā)生。



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