廣州高效液相色譜方法品牌企業,北京創新通恒

高效液相色譜的基本原理

色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobilephase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(stationphase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定相中滯留時間不同，從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。高效液相色譜法以經典的液相色譜為基礎，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有顆粒極細的高效固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。

高效液相色譜法概述

高效液相色譜(HPLC)是20世紀60年代后期發展起來的分離分析技術，是現代分離測定的重要手段。問世以來，因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學及臨床分析。

在現代高效液相色譜分析中，色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開發所需的時間，并且使方法更具穩定性。

高效液相色譜基本原理

液相色譜根據分離機理的不同可分為：

?液固吸附色譜

?液液分配色譜

?離子交換色譜

?離子對色譜法

?分子排阻色譜(或凝膠滲透色譜)

（一）液-固吸附色譜

流動相為液體，固定相為固體吸附劑，根據物質吸附作用的不同來分離物質。

（二）液-液分配色譜

流動相和固定相都是液體的色譜法即為液-液色譜，是利用樣品組分在兩種不相溶的液相間的分配來進行分離。一種液相為流動相，另一種是涂于載體上的固定相。

流動相極性小于固定相極性的液-液色譜法稱為正相分配色譜法。

流動相極性大于固定相極性的液-液色譜法稱為反相分配色譜法。

（三）離子交換色譜

（四）離子對色譜法

（五）分子排阻色譜法