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發布時間:2021-07-27 16:23  






你對制備色譜陌生嗎?還不進來看看它的特點
很多初接觸色譜領域的朋友對制備色譜這個名詞比較陌生。其實,在化學化工醫學等廣泛采用的層析法以及薄層色譜就是較為典型的制備色譜,換句話說,將分析色譜的進樣量增大,同時得出大量的所需物質(餾分)的過程就可以稱為制備色譜。分析色譜的目的,是分析出混合物中一個(或者幾個)純物質的含量。制備色譜的目的,是從混合物中得到純物質。而制備色譜系統則是利用制備色譜的思想能得到純化物質的多個分析測試設備聯用的總稱。 分析色譜是制備色譜的基礎。當我們在分析色譜上取得了良好的分離效果時,可以將其放大,應用到制備色譜上,由此,我們需要考慮調整上樣量,流速,梯度:
1.上樣量的調整: 他與分析色譜柱和制備色譜柱的柱長和柱內徑有關:
具體關系時;制備柱上樣量/分析柱上樣量=制備柱長/分析柱長*制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;
2.流速的調整:
制備柱流速/分析柱流速=制備柱體積/分析柱體積=制備柱長/分析柱長制備柱內徑的平方/分析柱內徑的平方;
3.梯度的調整:
制備柱梯度/分析柱梯度=制備柱體積/分析柱體積*制備柱流速/分析柱流速;
液相色譜的五大系統
1、進樣系統進樣系統分為手動進樣閥和自動進樣器。
2、輸液系統輸液泵按輸出液恒定的因素分恒壓泵和恒流泵。對液相色譜分析來說,輸液泵的流量穩定性更為重要,這是因為流速的變化會引起溶質的保留值的變化,而保留值是色譜定性的主要依據之一。因此,恒流泵的應用更廣泛。
輸液泵按工作方式分為氣動泵和機械泵兩大類。機械泵中又有螺旋傳動注射泵、單活塞往復泵、雙活塞往復泵和往復式隔膜泵。
3、分離系統分離系統包括色譜柱、保護柱以及柱溫箱。
色譜柱:色譜柱是樣品分離的核心。色譜柱在使用前必須仔細閱讀說明書,了解色譜柱使用的pH值范圍、溶劑耐受范圍、壓力范圍和維護方法等事項。色譜柱使用完后,需及時對色譜柱進行沖洗。沖洗完成后,應該將色譜柱從儀器上拆下來,兩端用廠家配的堵頭密封后,保存在色譜柱盒里。
保護柱:保護柱的作用主要是防止吸附性強的雜質對色譜柱污染,從而延長色譜柱的壽命。針對不同型號的色譜柱,應選擇相對應填料的保護柱。應注意柱芯也是有壽命的,應該定期進行更換。
柱溫箱:色譜柱溫度變化,可能會導致保留時間的變化。為了避免這個問題,建議使用柱溫箱。
4、檢測系統液相色譜常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器和熒光檢測器三種。
5、數據處理系統該系統可對測試數據進行采集、貯存、顯示、打印和處理等操作,使樣品的分離、制備或鑒定工作能正確開展。
液相色譜儀的構造
液相色譜系統主要由流動相儲液瓶、輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器和記錄儀組成,其整體組成類似于氣相色譜,但是針對其流動相為液體的特點作出很多調整。液相色譜的輸液泵要求輸液量恒定平穩,進樣系統要求進樣便利、切換嚴密。同時,由于液體流動相黏度遠遠高于氣體,為了減低柱壓,液相色譜的色譜柱一般比較粗,長度也遠小于氣相色譜柱。
高效液相色譜儀原理
高效液相色譜法的原理是在原始的經典色譜法基礎上面引用氣象色譜的理論,把原來的流動性改變為很高壓力可達到4.9′107Pa。色譜柱則是用特殊的方式用小顆粒裝填而成。造成的結果就是色譜柱的柱效遠遠高于原始的經典液相色譜。并且它柱子使用后還能具有高度靈敏度檢測器。能夠對流出來的分析物進行連續檢測。