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大腸菌群檢驗方法

國家標(biāo)準(zhǔn)采用三步法，即：乳糖發(fā)酵試驗、分離培養(yǎng)和證實試驗。　　乳糖發(fā)酵試驗：樣品稀釋后，選擇三個稀釋度，每個稀釋度接種三管乳糖膽鹽發(fā)酵管。36±1℃培養(yǎng)48±2h，觀察是否產(chǎn)氣。

　　分離培養(yǎng)：將產(chǎn)氣發(fā)酵管培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種于伊紅美藍瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)18-24h，觀察菌落形態(tài)。

　　證實試驗：挑取平板上的ke疑菌落，進行革蘭氏染色觀察。同時接種乳糖發(fā)酵管36±1℃培養(yǎng)24±2h，觀察產(chǎn)氣情況。

　　報告：根據(jù)證實為大腸桿菌陽性的管數(shù)，查MPN表，報告每100ml（g）大腸菌群的MPN值。

大腸菌群并非細(xì)菌學(xué)分類命名，而是衛(wèi)生細(xì)菌領(lǐng)域的用語，它不代表某一個或某一屬細(xì)菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌，這些細(xì)菌在生化及xue清學(xué)方面并非完全一致，其定義為：需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。

酶底物法相比多管發(fā)酵法、濾膜法的優(yōu)勢特點優(yōu)勢特點：酶底物法為GB5750-2006收錄的用于大腸桿菌檢測標(biāo)準(zhǔn)方法，酶底物法是目前水中大腸桿菌檢測的先進方法，目前以其方便快捷，假陽性低，適用大量樣品快速檢測等優(yōu)點正逐步被國內(nèi)檢測部門所認(rèn)可。相對于多管發(fā)酵和濾膜法，酶底物法檢測步驟大大減少，而且對實驗環(huán)境要求不高，檢測時間可減少到24小時，在日常水樣監(jiān)測及應(yīng)急監(jiān)測中具有很好的應(yīng)用前景，可及時檢測，預(yù)防，較大限度的減少重大公共安全事故的發(fā)生幾率。

程控定量封口機操作規(guī)程

1.將電源開關(guān)及機身背后開關(guān)打開，橙黃色指示燈亮，儀器開始加熱。

2.10-30分鐘（時間受環(huán)境溫度及工作條件等因素影響）后，預(yù)熱完成，綠色指示燈亮，儀器達到封口溫度可進行封口操作。

3.把裝有樣品和Colitech試劑的定量盤放置在進樣口。

4.向儀器方向輕輕推送定量盤，儀器感應(yīng)后會自動進樣，帶動其進入封口。

5.整個進樣過程大概持續(xù)15秒。定量盤封口完成后，會從儀器后方送出，從后方拿取定量盤即可。

6.如果有多個定量盤待封口，可進行連續(xù)封口，中間間隔十幾秒種即可。

7.如果遇到類似定量盤未放平就進樣的狀況，可點擊反轉(zhuǎn)按鈕進行儀器反轉(zhuǎn)。如果定量盤已完全進入儀器，則不可進行反轉(zhuǎn)操作。

8.使用完畢后，關(guān)閉儀器電源并拔下電源線。