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              吉林生化試劑盒供應商在線咨詢「夢犀生物」

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              發(fā)布時間:2021-06-03 05:34  






              ELISA檢測試劑盒應用定性夾心檢測技術,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條,這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段,分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育,如果其中存在HEV IgM,這些就會與HEV 的多肽抗原結合,并固定在上面,洗板除去其它非特異性和樣品中的其它成份。


              1、 :操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。


              安全性1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。4. 試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。5. 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。6. 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。


              操作步驟1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

              2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

              3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

              4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

              5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板)。

              6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

              7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。




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