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制備液相色譜

制備液相色譜是一種用于食品科學技術、化學領域的分析儀器。

二元泵在高達150 ml/min的流速下實現高壓梯度溶劑混合；通過高靈敏度的2489紫外/可見光檢測器對目標化合物進行鑒別與分離，改善線性范圍以適應高濃度樣品； 可使用內徑不超過50 mm的色譜柱對從幾毫克到幾克不等的樣品進行可靠純化； 使用易于操作的ChromScope軟件，具備樣品組向導、層加進樣、關鍵餾分收集參數設置、模擬餾分收集以及自定義報告的功能。

本設備適用于快速制備復雜的混合物并獲得高純度、高回收率的產物。

什么是液相色譜?

液相色譜的定義是二十世紀早期由俄羅斯植物學家 MikhailS. 茨維特提出的。他先嘗試在裝滿顆粒的柱子上使用溶劑來分離從植物中提取的化合物(樹葉色素)。茨維特用顆粒填滿開口的玻璃柱。他發現兩種特殊的材料，粉筆末(碳酸鈣)和氧化鋁很有用。他將樣品(混勻植物葉的溶劑提取物)倒入柱中，并讓樣品流過顆、粒床。隨后加入純溶劑。隨著樣品由于重力自上而下流過柱子，可看到不同顏色的譜帶被分開，因為有些組分比另外一些移動得快。他將這些分開的不同顏色的譜帶與樣品中原有的不同化合物相關聯。他還根據每一種化合物對填料的化學親和性強弱，提出了分析這些化合物的分離規律。與顆粒填料有較強親和性的化合物移動慢，與溶劑有較強親和性的化合物移動快。這個過程可這樣描述:樣品中的化合物在流動的溶劑(流動相)與固體顆粒(固定相)間的分布不一樣。這樣使每一種化合物以不同的速度移動，從而產生了化合物之間的分離。

色譜法是根據混合物中各組分的化學特性對其進行分離的一種分離方法。

分析色譜強調的是各組分的完全分離以達到化合物確認和定量目的。而制備型(Prep)色譜或純化色譜則是指利用色譜方法分離出一定量達到足夠純度的化合物用于后續實驗或處理的色譜方法。

科學家首先要開發色譜方法，將目標化合物從原料、副反應或其它雜質中成功分離出來。從科研到工業企業純化色譜應用非常廣泛。盡管應用領域各不相同，用戶的一般要求卻非常相似，他們都希望分離出的終產物純度能達到相當純的化合物，實現科研或生產的需要。

采用液相色譜進行純化LC純化系統的配置與一般液相色譜系統基本相同，但增加了餾分收集器。樣品混合物被進樣至色譜柱，色譜柱根據組分特有的化學或物理性質對其進行分離。檢出組分時，系統會將其輸送至廢液，或者進行收集用于后續實驗。洗脫液收集操作既可由分析人員在組分洗脫時通過簡單的手動方式完成，也可以全自動進行，在自動收集操作中，檢測器信號會觸發餾分收集器將液流輸送至收集容器中。輸送至收集容器的餾分純度取決于分離過程中化合物與其它鄰近洗脫雜質的分離度。制備色譜的核心競爭力總結起來就是“多，快，好，省”。

液相色譜的操作步驟

1).首先對流動相進行過濾，根據需要選擇不同的濾膜，一般為有機系和水系，常用的孔徑為0.20um和0.45um。

2).對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。

3).正常情況下，儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘，然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑，則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘，直至色譜柱中有機相沖凈為止)。

4).一般情況下，流動相沖洗20-30分鐘后，儀器方可穩定，重要的是儀器基線走后，方可進樣測試。

5).同時進兩針標樣，將其結果相比較，其結果的比值在0.98-1.02之間后，就可以正式進行樣品的測試了。

6).樣品測試結束后，就要進行色譜儀及色譜柱的清洗和維護。如流動相為緩沖試劑，同樣也要用重蒸水清洗10-20分鐘，方可用有機相進行保護，否則，有損色譜柱。

7).關機時，先關計算機，再關液相色譜。

8).填寫登記本，由負責人簽字。