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發布時間:2020-12-01 06:17  





即用型Tris-HCl緩沖溶液,這個不需要配置了,采購時根據需要買對應pH的試劑就行。這個使用起來是快的,不過市場上產品的pH值是固定的幾個值,如果需要某一特定的pH,會比較難找,可能還是自己配置,這樣就得不償失了。需要注意的是,不管是哪一種類型的Tris試劑,都有幾個相同的特點:Tris對溫度敏感,因此調節pH時需控制在室溫;濃度改變對pH有顯著影響,緩沖液稀釋過度會改變pH值,降低緩沖能力;容易吸收空氣中的CO2,要做好密封工作。
三羥氨基CAS77-86-1,就是通常所說的Tris,也叫氨,是一種很常用的試劑,在工業合成、生化檢測、生物制藥領域都有廣泛應用;在采樣管病毒保存液中,屬于其配置溶液的一種重要的原料。三羥氨基Tris分子結構中含有一個氨基和三個醇羥基,氨基和三個羥圍繞中心碳原子形成類似的四面體結構。由于氨基的存在,Tris在水溶液中顯弱堿性,氨基可作為配位基團和很多酸形成Tris鹽,常見的有Tris-HCl,還有TEA、TEB、Tris甘氨酸、Tris磷酸等。病毒保存液中用的原料Tris和EDTA,實際TE緩沖液就是Tris加EDTA。
很多實驗的pH值設定在 7.4以模仿生物條件。假如你的蛋白在這個pH值下是穩定的,那就非常棒了!如果不是,就需要改變pH值找到目的蛋白在溶液中處于可溶性且不會降解的狀態。
一個經驗法則是:蛋白在它等電點pI附近的pH值溶液中會表現得不易溶解,因為蛋白在其等電點的pH值溶液中表面沒有凈電荷,從而容易聚集。這里推薦用Expasy的ProtParam工具快速簡便地計算蛋白等電點pI值,只要提交蛋白序列即可。