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發布時間:2020-12-19 04:03  





Tris中文品名為三羥;氨基;緩血酸胺;2-氨基-2-(羥)-1,3-丙二醇。是一種白Chemicalbook色結晶或粉末。溶于乙醇和水,微溶于、苯,不溶于、,對銅、鋁有腐蝕作用,有刺激性的化學物質。緩沖特性Tris為弱堿,在25℃下,它的pKa為8.1;根據緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。TrisChemicalbook堿的水溶液pH在10.5左右,一般加入鹽酸以調節pH值至所需值,即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對于Tris的pKa的影響。
TE緩沖液 Tris鹽酸緩沖液中加入EDTA制成“TE緩沖液”,TE緩沖液是弱堿性,對DNA的堿基有保護性,因此,DNA在TE中的穩定性較好,不易被破壞完整性或產生開環及斷裂,TE緩沖液被用于DNA的穩定和儲存。
將調節pH值的酸溶液換成,則獲得“TAE緩沖液”(Tris/Acetate/EDTA),TAE是使用廣泛的緩沖系統。其特點是超螺旋在其中電泳時更符合實際相對分子質量,且雙鏈線狀DNA在其中的遷移率也較快,電泳大于13kb的片段時用TAE緩沖液將取得更好的分離效果。
許多緩沖液中含有NaCl,以幫助保持蛋白的可溶性和模擬生理條件。一般常用150 mM的NaCl。
在不同的蛋白純化步驟中,可能需要改變鹽離子的濃度。例如,如果是通過離子交換層析進行蛋白純化,一開始需要降低鹽離子的濃度(5~25mM)避免高離子強度和蛋白競爭和填料結合,這樣可防止蛋白從離子交換柱中流穿,從而使柱子能夠結合目的蛋白,洗脫除去雜蛋白。