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發布時間:2021-08-17 06:23  
蛋白質結晶方法
液-液擴散(Liquid–Liquid Diffusion) 這種方法中,蛋白質溶液和含有沉淀劑的溶液是彼此分層在一個有小孔的毛細管中,一個測熔點用的毛細管一般即可(如圖1.2)。下層是密度大的溶液,例如銨或PEG溶液。如果如MPD被用作沉淀劑,它會在上層。以1:1混合,沉淀劑的濃度應該是所期終濃度的二倍。兩種溶液(各自約5μl)通過針頭導入毛細管,先導入下層的。通過一個簡易的搖擺式離心機去除氣泡。再加入上層,進而兩層之間形成一個明顯的界面,它們會逐漸彼此擴散。 Garc′?a-Ruiz and Moreno(1994)已經發展液-液擴散技術至法。蛋白質溶液通過毛細力被吸入狹窄的管中,管的一端是封閉的。接著,開放端入置于小容器的凝膠中,凝膠使得管豎直,蛋白質溶液與凝膠接觸。含有沉淀劑的溶液被倒在凝膠上,整個裝置被保存于封閉的盒子以防蒸發。沉淀劑通過凝膠和毛細管的擴散時間可以由毛細管插入凝膠的深度控制,從而蛋白質溶液中即可形成過飽和區域,毛細管底部高而頂部低。這也可作為一個篩選佳結晶條件的額外信息。
普通蛋白結晶板
在普通24孔板的基礎上發展出來用于結晶學研究。透明的PS材料,平整無變形的底提供了優異的光學性能。孔緣突出于板面,減少孔間污染的風險。在“沉滴”(Sitting Drop)中,需要用到“微橋”(Micro-Bridges),結晶過程中或之后,“微橋”可以轉移到另外一個孔。可用VIEWseal?(676070)密封,也可以用蓋玻片通過硅油密封每一孔。
用于油下結晶(Microbatch),梯形的孔形可將樣品溶液集中于孔*,平的底部可在顯微鏡下觀察結晶的生長。
蛋白結晶板技術
提出來的一項新型的分析技術,是當前分析科學活躍的發展領域之一,代表了新世紀分析儀器的發展方向。微流控芯片的發展有賴于不斷出現的微機電加工技術,微流控芯片的結構越來越復雜,功能也越來越多樣化,由此,研究和探索簡便的加工技術成為微流控技術發展的一個重要組成部分,本的研究工作將圍繞著微流控蛋白質結晶芯片不同材料的性能與功能要求來進行相關加工技術的探討。 蛋白質結晶微流控芯片是一種用于蛋白質結品條件高通量、快速篩選的新設備,對于結構生物學的發展具有重要意義,是目前研究的熱點。本根據蛋白質結晶系統的要求,設計了具有雙層結構的微流控芯片。