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              發布時間:2020-07-18 11:00  






              使用血清細胞培養的操作技巧

              1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時,請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷凍。

              2.將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須注意的是,融解過程中必須規則地搖晃均勻。

              3.一旦在新鮮培養基中添加了血清和抗生su時,應該在兩到三周內使用它。因為一些抗生su和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

              4.解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。


                 抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體的特異性高,它的識別能力就強。衡量特異性通常以 交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線,計算各自的結合率,求出各自在IC50時的濃度,并按 公式計算交叉反應率。如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質的IC50濃度幾乎是無窮大時,表示這一抗血清與其他抗原物質的交叉反應率近似為0,即該血清的特異性較好。





                  細胞培養的污染源:微生物污染:微生物污染的原因可分為2個階段:實驗準備階段和實驗操作過程。準備階段的原因包括:實驗耗材滅菌不徹底;細胞房清潔度不夠,增加微生物污染風險;超凈臺潔凈度不夠,消毒不夠徹底,紫外線沒有預先照射足夠時間,表面沒有用酒精擦拭;沒有帶無菌乳膠手套;試劑本身已經污染,沒有檢測出來。實驗操作中的污染,往往是不夠嚴謹,粗心大意造成,如:手從無菌試劑的上方經過;移液器操作不當,液體接觸到移液器前端;移液管吸液過猛;槍頭沒有更換,較差污染等。不同的微生物污染物對細胞的影響也有差別,微生物中支原體和病毒對細胞形態和技能的影響是長期的,緩慢的和潛在的。而霉菌和細菌增殖迅速,能在很短的時間內抑制細胞生長或產生有毒物質殺滅細胞。  


              胎牛血清的使用注意事項:

               1、解凍血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。

              C至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實驗顯示非常容易產生沉淀物。

               2、解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生.

               3、請勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。



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