石家莊NH2固相萃取柱廠家優惠報價 碩譜生物質量可靠

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反相模式下，溶劑體系的極性應以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減，并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會洗脫目標物，所選擇的淋洗劑應在不洗脫目標物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，所選洗脫劑應能碰巧完全洗脫目標物。

正相位模式是 SPE小柱相的固定相極性大于流動相極性的分離模式。主要用途：

固相萃取材料極性表面與物極性官能團極性相互作用；極性力比非極性力強，但比離子力弱；常用的極性基團有羥基，胺基，巰基等。弱極化基質環境有利于形成極性力，因為弱極化溶劑不能與極性固定相形成氫鍵功能團。結果表明： SPE正相萃取后，樣品基質多為弱極性，如正己烷、二1氯甲1烷、菜油等，而目標物多含有極性官能團。

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渠道效應

當 SPE小柱填料裝實后，流速過小柱時，液體是以層流通過填料層，將填料層充分浸潤，潤濕的液面截層向上推進，見附圖；流速過大時，柱床厚度過大，可能在填料內形成溝道，液流將穿過溝道，快速通過小柱，而使填料浸潤不足，從而使得體與填料的接觸面積大大減少，嚴重影響填料對目標物質的保留性。

溶液環境的 pH如何影響化合物在柱狀物上的保持性，我們為什么要關注該化合物的 pKa值，這些因素需要放在C18柱狀物上嗎？

A：首先， Ka指酸度系數，也稱為酸離解常數，可以被理解為酸離解H離子的能力，而 pKa=- lgKa，對于酸，在環境中 pH離子的平衡如下

常用極性固定相包括：硅膠、氧化鋁、弗羅里硅土和含有氰基(CN)、氨基(NH2)、二醇基(2 OH)的粘接硅膠。

正相態時，溶液體系的極性應按樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的順序遞增，洗脫強度也隨之遞增。要確保所選的樣本溶劑不會洗脫目標物，所選的淋洗液應在不洗脫目標物的前提下，很大限1度地洗脫干擾物，這樣洗脫目標物才能碰巧完全洗脫目標物。

因此，面對反相、正相固相萃取，在實際應用中應選擇哪一種？鑒于大部分化合物都具有多種功能基團，在實際操作中，主要根據目標物和干擾物的性質考慮采用何種萃取機理。

負離子交換填充物(SAX, MAX)

·分析物：陰離子(酸)化合物

·方法：

(a)活化：樣品在非極性有機溶1劑中作活化處理時，可用樣品溶劑：在極性溶劑中作樣品處理時，可用水溶性有機溶1劑作活化處理，然后用水平衡，然后用合適 pH值的緩沖液平衡。

上樣：樣品溶液的 pH值應大于其 pKa的兩個單位(以保證其電荷)。

洗脫液 pH值：洗脫液 pKa小于兩個單位(中和分析物的電荷)。

相對于弱酸性化合物而言，弱堿性化合物在陽離子交換固相萃取過程中99%的分解都是陽離子，這一弱堿性化合物所處的環境系統的 pH值必須低于其 pKa至少兩個 pH單位。洗脫時，環境體系的 pH值應高于化合物的 pKa值至少兩個 pH單位，99%的化合物此時為中性狀態，可通過適當的溶劑從陽離子交換柱中洗脫。

選擇離子交換固相萃取柱的種類：為能有效地洗脫吸附在一起的離子化合物，對于含有強離子官能團的目標化合物，一般選用弱離子交換柱；對于含有弱離子官能團的化合物，一般選用強離子交換柱。該方法可避免目標化合物與吸附劑官能團同時處于離子化狀態，使目標化合物始終保持在不能洗脫的保留狀態。

反相式C18分離柱

C18是十八烷基碳鏈上的反相固定相的統稱。除以普通硅膠為基質外，以C18鏈為基質的高聚物小球、氧化鋁、氧化鋯等反相固定相，均可稱為C18鏈。有很多種類型的C18，常見的C18是硅膠基質，稱為 ODS,C18能夠在純水中工作，被稱為C18-AQ。

C18反相柱的固定相為非極性固定相，流動相極性大于固定相極性，常用的溶劑一般為水和甲1醇、乙1腈、四氫呋1喃、異丙1醇等與水互溶的溶劑，適合分離非極性或弱極性的化合物，其洗脫順序一般為樣品極性從高到低。

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劑時值；

洗滌液通道和柱子，有溫度控制，加熱到30攝氏度容易沖洗；

長期使用緩沖液應注意觀察接頭處是否有析出，如有白鹽析出，用10%硝i酸定期沖洗液路(取出柱子，沖洗30 mL10%硝i酸溶液，再用5倍水沖洗)可避免液路堵塞；

選用緩沖液要使用可靠的試劑，避免不純鹽引起不必要的麻煩；過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同，但溶液中不含緩沖鹽。

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對由非極性力吸附到反相 SPE柱上的目標物，可用弱極性溶劑洗脫，如氯i仿、環己i烷、乙i酸乙i酯等。只有當溶劑的洗脫強度足夠大時，才能使目標物與吸附劑之間的范德華力破壞，使目標物從 SPE柱洗脫。即使是極性更強的甲i醇，對許多化合物而言，也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候，單種溶劑無法徹底洗脫疏水性強的目標物，可以考慮使用二氯甲i烷：乙i酸乙i酯(1:1，體積比)。

反相模式下，溶劑體系的極性應以樣品溶劑、淋洗溶劑、洗脫溶劑的次序遞減，并以遞增程度遞減。要確保所選擇的樣本溶劑不會洗脫目標物，所選擇的淋洗劑應在不洗脫目標物的前提下，zui大限度地洗脫干擾物，所選洗脫劑應能碰巧完全洗脫目標物。