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發(fā)布時間：2020-12-19 08:10
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儀器介紹：高通量組織研磨儀 [1]高通量組織研磨儀的亮點(diǎn)在于較大限度的操作便捷性和安全性。QM100以其優(yōu)越的性能和高超的靈活度而成為實(shí)驗(yàn)室的不可或缺的儀器。由于采用了集成電機(jī)開關(guān),因此只有當(dāng)機(jī)蓋處于閉合狀態(tài)下儀器才能啟動。獨(dú)有的Easy Clamp系統(tǒng),可輕松安全地緊固較大體積為100ml的研磨罐。為了滿足食品和制藥行業(yè)的要求，高通量組織研磨儀的Easy Clamp系統(tǒng)和擺臂由的不銹鋼制成,外殼材質(zhì)同樣為不銹鋼。新型電機(jī)的應(yīng)用以及電機(jī)直接傳動使得高通量組織研磨儀維護(hù)十分方便。
組織研磨儀采用垂直振蕩，使研磨管內(nèi)冷凍的樣品與研磨球型號碰撞，產(chǎn)生的剪切力和撞擊力使組織完全破碎。室溫靜置10分鐘，待RNA充分沉淀（為減少RNA降解，此步驟可省略）。
組織研磨儀的使用方法如下：1.需將待測的樣品經(jīng)過簡單切碎稱重后，放入50ml離心管中。2.然后加入兩粒15mm研磨珠，在高通量組織研磨儀上以1000 r/min研磨3分鐘，即可得到初步的農(nóng)殘檢測樣品。3.再經(jīng)過提取液分離、鹽類除水和吸附劑除雜之后，就可以得到清液，用于進(jìn)一步的檢測分析。
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DNA的粗提
1) 將高通量組織研磨儀研磨好的樣品取出于65℃水浴45min，中途間隔（輕柔）振蕩三次混勻；
2) 冷卻后加入等體積：易戊醇（24：1），輕柔顛倒混勻使乳化10min；
3) 7000g-8000g離心10min（18-20℃）；
4) 吸取上清于另一干凈的離心管中；
5) （根據(jù)需要可用氯放：易戊醇如上法重復(fù)抽提一次，吸取上清）；
6) 加入與上清液等體積
7) 離心法沉淀DNA；
8) 在75%乙醇中漂洗DNA數(shù)分鐘以上，用Tip頭吸干乙醇；
9) 用1ml 75%乙醇再漂洗一次；
10) 沉淀于室溫或64℃以下的恒溫箱中干燥片刻至剛出現(xiàn)半透明，不要過度干燥；
11) 用50μlTE溶解沉淀，可用65℃水浴助溶，DNA粗提物可用于粗略PCR等。
利用高通量組織研磨儀對要進(jìn)行DNA提取的植物樣品研磨的好處在于：研磨過程中，不會對植物組織造成破壞，可根據(jù)需要選擇干磨、濕磨及冷凍研磨，封閉式的樣品管，避免樣品交叉污染。
