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顯微鏡成像原理

北京老上光儀器有限公司專業(yè)生產(chǎn)、銷售顯微鏡，我們?yōu)槟治鲈摦a(chǎn)品的以下信息。

以下以電子顯微鏡為例

電子顯微鏡是根據(jù)電子光學(xué)原理，用電子束和電子透鏡代替光束和光學(xué)透鏡，使物質(zhì)的細微結(jié)構(gòu)在非常高的放大倍數(shù)下成像的儀器。

電子顯微鏡的分辨能力以它所能分辨的相鄰兩點小的間距來表示。20世紀70年代，透射式電子顯微鏡的分辨率約為0.3納米(人眼的分辨本領(lǐng)約為0.1毫米)。讀數(shù)顯微鏡刻度值與標(biāo)準尺刻度不重合主要原因:物鏡鏡頭松動或物鏡鏡頭與鏡筒連接處墊圈丟失，焦距變化所致。現(xiàn)在電子顯微鏡放大倍率超過300萬倍，而光學(xué)顯微鏡的放大倍率約為2000倍，所以通過電子顯微鏡就能直接觀察到某些重金屬的原子和晶體中排列整齊的原子點陣。

顯微鏡結(jié)構(gòu)——照明部分

裝在鏡臺下方，包括反光鏡,集光器。

(1)反光鏡:裝在鏡座上面，可向任意方向轉(zhuǎn)動，它有平、凹兩面，其作用是將光源光線反射到聚光器上，再經(jīng)通光孔照明標(biāo)本，凹面鏡聚光作用強，適于光線較弱的時候使用，平面鏡聚光作用弱，適于光線較強時使用。

(2)集光器(聚光器)位于鏡臺下方的集光器架上，由聚光鏡和光圈組成，其作用是把光線集中到所要觀察的標(biāo)本上。

①聚光鏡:由一片或數(shù)片透鏡組成，起匯聚光線的作用，加強對標(biāo)本的照明，并使光線射入物鏡內(nèi)，鏡柱旁有一調(diào)節(jié)螺旋，轉(zhuǎn)動它可升降聚光器，以調(diào)節(jié)視野中光亮度的強弱。

②光圈(虹彩光圈):在聚光鏡下方，由十幾張金屬薄片組成，其外側(cè)伸出一柄，推動它可調(diào)節(jié)其開孔的大小，以調(diào)節(jié)光量。

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顯微鏡結(jié)構(gòu)——光學(xué)部分

(1)目鏡:裝在鏡筒的上端，通常備有2-3個，上面刻有5×、10×或15×符號以表示其放大倍數(shù)，一般裝的是10×的目鏡。

(2)物鏡:裝在鏡筒下端的旋轉(zhuǎn)器上，一般有3-4個物鏡，其中短的刻有'10×'符號的為低倍鏡，較長的刻有'40×'符號的為高倍鏡，長的刻有'100×'符號的為油鏡，此外，在高倍鏡和油鏡上還常加有一圈不同顏色的線，以示區(qū)別。

顯微鏡的放大倍數(shù)是物鏡的放大倍數(shù)與目鏡的放大倍數(shù)的乘積，如物鏡為10×，目鏡為10×，其放大倍數(shù)就為10×10=100。

顯微鏡目鏡長度與放大倍數(shù)呈負相關(guān)，物鏡長度與放大倍數(shù)呈正相關(guān)。即目鏡長度越長，放大倍數(shù)越低;物鏡長度越長，放大倍數(shù)越高。

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顯微鏡在檢測上的作用

熒光顯微鏡除了具體傳統(tǒng)顯微鏡的明場觀察功能外，比如觀察培養(yǎng)皿里的貼壁細胞或懸浮細胞，更主要的用途是作為熒光觀察的工具；利用相應(yīng)的熒光染料對進行標(biāo)記，通過熒光顯微鏡觀察，就可以判斷是否與病毒細胞進行結(jié)合，在細胞核中發(fā)現(xiàn)熒光特征，就證明了病毒的存在，這是熒光的直接法觀察。此外還有間接法熒光觀察方法，該方法對操作人員的經(jīng)驗要求比較高。如果有較重的霉點或霉斑無法除去時，可用棉簽蘸水潤濕后粘上碳酸鈣粉(含量為99%以上)進行擦拭。在病毒實驗中，斑點熒光檢測法應(yīng)用也是非常廣泛的，該方法是對二抗進行相應(yīng)的熒光染料標(biāo)記，然后再利用熒光顯微鏡進行檢測，如果存在被病毒的細胞，就能形成對應(yīng)的熒光斑點。