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如果檢測到熒光信號超過域值被認為是真正的信號，它可用于定義樣本的域值循環數（Ct）。Ct值的含義是：每個反應管內的熒光信號達到設定的域值時所經歷的循環數。研究表明，每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數的對數存在線性關系，起始拷貝數越多，Ct值越小。利用已知起始拷貝數的標準品可作出標準曲線，因此只要獲得未知樣品的Ct值，即可從標準曲線上計算出該樣品的起始拷貝數。廣州勱博--病毒核酸提取系統銷售一個豬場對進場人員的衣物進行熏蒸消毒，專門制作了一個消毒柜，但由于開始設計不理想，消毒柜太大，無法進入屋內，就放在了舍外。

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擴增序列特異性檢測方法是在PCR反應中利用標記熒光染料的基因特異寡核苷酸探針來檢測產物，它又可分為直接法和間接法。間接的方法就是利用水解探針的策略。目前在real-time Q-PCR中廣泛使用的TaqMan系統就是運用了這個原理。PCR擴增時在加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團，此時5′端熒光基團吸收能量后將能量轉移給臨近的3′端熒光淬滅基團（發生熒光共振能量轉移，FRET），因此探針完整時，檢測不到該探針5′端熒光基團發出的熒光。廣州勱博--生豬屠宰場病毒核酸提取系統經銷根據動物防疫法及其配套規章規定，縣級動物衛生監督機構依法向屠宰場派駐(出)官i方獸醫實施屠宰檢疫。

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FQ-PCR在醫學栓測中有價值的應用領城就是對感i染性疾病的診斷,只要有限的核酸序列清楚,運用FQ-PCR技術,檢測任何病原體。目前,對一些培養周期長或缺乏穩定可靠的檢測手段的病原體,可以考慮用FQ-PCR檢測,為臨床診斷提供依據FQ-PCR對病原體的檢測克服了免i疫學檢測的“窗口期“問題,可判斷疾病是否隱性或亞臨床狀態。FQ-PCR技術可以應用于腫癟的研究及診斷。專門的熱循環儀配備熒光檢測模塊，用于監測擴增時的熒光，檢測到的熒光信號反映了每個循環擴增產物的量。

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實時熒光定量PCR的基本原理：理論上，PCR過程是按照2n（n代表PCR循環的次數）指數的方式進行模板的擴增。但在實際的PCR反應過程中，隨著反應的進行由于體系中各成分的消耗（主要是由于聚合酶活力的衰減）使得靶序列并非按指數方式擴增，而是按線性的方式增長進入平臺期。因此在起始模板量與終點的熒光信號強度間沒有可靠的相關性。如采用常規的終點檢測法（利用EB染色來判斷擴增產物的多少，從而間接的判斷起始拷貝量），即使起始模板量相同經PCR擴增、EB染色后也完全有可能得到不同的終點熒光信號強度。短距離可經空氣傳播、污染的飼料、泔水、剩菜及肉屑、欄舍、車輛、器具和衣服等均可間接傳播本病。

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傳統的PCR定量是應用終點PCR來對樣品中的模板量進行定量,通常用凝膠電泳分離,并用熒光染色來檢測PCR反應的終擴增產物。但在PCR反應中,由于模板、試劑、焦磷酸鹽分子的聚集等因素影響聚合酶反應,終導致PCR反應不再以指數形式進行而進入“平臺期”,而且一些反應的終產物比另一些要多,因此終點PCR反應方法定量并不準確。此外,終點PCR還容易交叉污染,產生假陽性。溫度上的高分辨率使得運用定量PCR儀進行高分辨率熔解曲線（HRM）分析基因型成為可能。

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核酸提取儀原理是，經裂解液裂解后，細胞核中會釋放出核酸分子，會被吸附在磁珠表面，而蛋白質等物質不會被吸附，結合了核酸的磁珠被磁性物質固定在管壁上轉移到洗脫管中，經過反復洗脫，后我們可以得到純凈的DNA。根據其使用范圍可以分為兩類，一種是大型核酸提取儀，另一種是小型核酸提取儀；（2）因為熒光素種類以及檢測光源的局限性，從而相對地限制了real-timeQ-PCR的復合式（multiplex）檢測的應用能力。主要是利用磁珠純化核酸及蛋白質從而達到提取核酸的目的，在細胞、動植物組織等研究方面，一個樣品用一個探針，有效防止樣品之間的交叉污染。

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非洲（African Swine fever，ASF）是由非洲病毒（African Swine fever virus，ASFV）感i染家豬和各種（非洲、歐洲等）引起一種急性、出i血性、烈性傳i染病。世界動物衛生組織（OIE）將其列為法定報告動物疫病，該病也是我范的一類動物疫情。其特征是發病過程短，急性和急性i感i染死i亡率高達100%，臨床表現為發熱（達40~42℃），心跳加快，呼吸困難，部分咳嗽，眼、鼻有漿液性或粘液性膿性分泌物，皮膚發紺，淋巴i結、、胃腸粘膜明顯出血，非洲臨床癥狀與癥狀相似，只能依靠實驗室監測確診。SYBR僅與雙鏈DNA進行結合，因此可以通過溶解曲線，確定PCR反應是否特異。

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非洲是一種傳i染性強，危害嚴重的豬感i染病毒性疾病。非洲病毒（ASFV）通過直接或間接接觸傳播，在豬群眾傳播速度極快。而且，該病毒在未經烹飪的生豬相關制品中存活時間很長，這一特點使得非洲容易向未感i染區域傳播。由于非洲可以感i染，而軟蜱通過叮咬成為非洲主要傳播途徑之一，這也給非洲的凈化帶來難度。非洲的感i染致死率極高，接近100%，并且目前沒有有效的疫i苗和治i療手段。PCR技術在傳i染病診斷上具有廣泛的應用，該技術靈敏度高，特異性強，能夠在豬、豬產品及環境中病毒的“蹤跡”進行有效的監控，是農業農村部指i定的非洲首i選診斷技術。廣州勱博--屠宰場熒光定量PCR磁珠法核酸提取，具有傳統DNA提取方法無法比擬的優勢，主要體現在：①能夠實現自動化、大批量操作，符合生物學高通量的操作要求，使得傳i染性疾病爆發時能夠進行快速及時的應對，這一特點使得傳統方法望塵莫及。