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              酶聯ELISA試劑盒報價值得信賴「中檢維康」

              發布時間:2021-09-01 15:39  

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              ELISA試劑盒的成分

              1 預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T

              2 酶標記: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 1

              3 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2

              4 緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 1

              5 標記稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 1

              6 顯色劑: TMB底物液 15mL x 1

              7 終止液: 1N硫酸 12mL x 1

              8 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) (450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記和顯色劑)



              ELISA試劑盒——會出現的問題及解決辦法

              吸光值均偏高(或線性不夠陡)。

              a.原因:室溫太高(>25℃)。

              解決辦法: 若無法降低室內溫度,請適當縮短步驟4的溫育時間。

              b.原因:底物溶液受到污染。

              解決辦法: 若發現底物溶液已呈現淡藍色,請不要再使用。

              c.原因:反應時間超過太久。

              解決辦法:請控制反應時間。

              d.原因:酶標記物污染了盒內其它試劑。

              解決辦法:使用過的吸頭應立即丟棄,可避免試劑間相互污染,凡是試劑(特別是酶標記物與底物溶液)接觸過的容器應立即清洗干凈。(先以漂白水浸泡,再以清水沖洗干凈,可確保無殘留)



              Elisa試劑盒——Elisa實驗常見問題及解決方案

              背景深,全部呈有色(通常的Elisa背景值OD<0.2) 

              1  洗滌不充分,洗后未拍干,樣品中其它成分殘留或酶標記物殘留 洗液準確配制;充分洗滌,靜置15秒,徹底拍干。加樣或加酶拍板的濾紙應棄去不用,不要反復使用,否則易造成污染。

              2  底物污染,未避光保存,出現顏色 棄去底物,重新配置

              3  樣品稀釋液污染 棄去稀釋液,重新配置

              4  吸頭重復使用,未洗凈或消毒不徹底 吸頭盡可能一次性使用

              5  不正確的孵育時間,溫度(尤其是底物孵育的時間) 常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。完全按照說明書要求。

              6  偶聯抗體(streptavidin-HRP)濃度過高 按照說明書調整到合適的濃度

              7  ELISA板子不正確的貯存 酶標板貯存于2-8 ℃;使用結合力低點的Elisa板

              8  沒有正確封閉 在標準品稀釋液中加入動物蛋白或延長封閉時間

              9  樣本溶血嚴重 建議使用非溶血或輕微溶血樣本,嚴重溶血樣本會導致背景偏高。



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