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發布時間:2020-12-29 08:27  
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生物緩沖劑Tris被人熟知的應用,就是用作核酸和蛋白質的溶劑以及生物緩沖劑。Tris-HCl,NaCl,tween20這三種物質可組成TBST緩沖液,是做Western Blotting中常用的一種洗膜緩沖液;Tris-HCl中加入EDTA可制成TE緩沖液,可用于DNA的穩定和存儲;將調節pH值的酸溶液換成,可獲得TAE緩沖液,換成硼酸可獲得TBE緩沖液,這兩種緩沖液常用于核酸電泳實驗中。
Tris-HCl試劑桶裝。Tris、Tris鹽酸鹽、Tris-HCl緩沖溶液即用型pH值區別:1、Tris或Tris堿pH值為10-12,呈弱堿性;2、Tris鹽酸鹽pH值為4-6,呈弱酸性(有些產品為Tris與其鹽酸鹽的混合粉末,pH會有所上升);3、Tris-HCl緩沖溶液通常是按一定的Tris與HCl比例配置好的即用型緩沖溶液,pH值取決于兩者比例,常用的有7.4,7.6,8.0,8.8等,一般呈近中性,偏弱堿性。
此外,回收時也緩沖系統進行電泳。但是,TAE的缺點是緩沖容量小,除非有循環裝置使兩極的緩沖液得到交換,否則長時間電泳是不可選用的。TBE緩沖液 酰胺實驗以及瓊脂糖凝膠電泳將調節pH值的酸溶液換成硼酸則獲得“TBE緩沖液”(Tris/Borate/EDTA)。TBE Buffer是分子實驗中常用的緩沖液,由Tris和硼酸、EDTA組成,所以簡稱為TBE buffer。
后,可以通過添加一些穩定劑到蛋白純化緩沖液中,以幫助提高蛋白純化時的溶解度和穩定性。在緩沖液中添加惰性蛋白BSA某種程度可以穩定蛋白,但必須確保這些加入的穩定蛋白不干擾實驗。有時添加甘油、聚乙二醇等添加劑可以增加緩沖液粘度,有助于防止蛋白聚集。另外,使用少量的表面活性劑和一些離子化合物如硫酸鹽、氨基酸、檸檬酸等可以屏蔽蛋白間的離子相互作用,幫助蛋白溶解。