臺灣洋蔥亞細胞定位方法電話“本信息長期有效”

武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司；方法首先采用Western印跡方法檢測過表達MAGI3后E-cadherin蛋白表達條帶的遷移變化,。公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺；可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。

多胺作為一種多聚陽離子,在基因表達、蛋白活性等多層面調節細胞功能。多胺轉運蛋白能夠特異性介導多胺類物質跨膜運輸,在調節多胺濃度、調控抗性基因表達、維持mRNA水平、增強植物抗逆性等方面具有重要功能。構建PnCHI1的原核表達載體,誘導并純化獲得重組蛋白,體外平板抑菌實驗結果顯示PnCHI1原核重組蛋白對尖孢鐮刀菌、茄腐鐮刀菌、輪枝鐮刀菌3種三七根腐病菌的菌絲生長具有很強的抑制活性。目前,已知擬南芥(Arabidopsis thaliana)LHR1基因編碼質膜多胺轉運蛋白AtPUT3,控制多胺的吸收,參與植物熱脅迫早期反應中的分子調控過程,但水稻中(Oryza sativa),多胺參與植物熱脅迫早期反應的具體分子機制尚不明確。通過序列對比,發現水稻Os02g47210和Os03g37984是擬南芥AtPUT3的功能同源基因。為了初步闡明水稻多胺轉運蛋白LHR1在熱脅迫早期防御反應及提高植物耐熱性上的功能,本研究利用生物信息學、生化與分子生物學實驗、遺傳學等手段對水稻LHR1同源基因的功能進行初步研究,結果如下:1.了水稻OsLHR1(Os03g37984.1、2、3和Os02g47210)基因全長CDS,并對該基因編碼的蛋白質進行有效的生物信息學分析,結果顯示:Os03g37984有5種不同的剪切方式,編碼5種OsPUT3蛋白。

武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司；構建MTR_8g079250的葉片亞細胞定位載體,通過根癌農介導注射葉片的方式進行轉化,結果表明目的基因主要定位在細胞膜和細胞核上。公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺；可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。

目的構建通用型植物GFP標簽蛋白表達載體,研究蛋白質的細胞內定位對蛋白質組學和代謝組學等研究的意義。方法構建2種GFP標簽蛋白質表達載體,分別在GFP的N和C端預留位點,以目的基因。利用該基因載體,分別內切酶Fok I的切割結構域與MS2噬菌體外殼蛋白MCP的串聯蛋白（Fok I：MCP：Fok I,FMF）至GFP的N和C端,得到FMF與GFP的融合蛋白GFP：FMF和FMF：GFP,其中FMF的N端帶有細胞核定位信號。從圖B中發現GaMYB2-GFP的融合表達載體只能在細胞核中能看到綠色熒光，這進一步證明該蛋白不具有跨膜蛋白結構，定位在細胞核中，具有轉錄因子的一般特征。利用農介導植物瞬時表達侵染本氏和洋蔥表皮細胞,觀察GFP熒光表達情況。結果成功構建了2種融合了目的基因和GFP的表達載體p ER35GFP-FMF和p ER35FMF-GFP。激光共聚焦結果顯示侵染了只含GFP載體的農的細胞,可在細胞核和細胞質中檢測到GFP的綠色熒光,而侵染了含核定位信號FMF：GFP和GFP：FMF 2種融合蛋白載體的農的細胞,只在細胞核中觀察到綠色熒光。結論該載體系統可運用于研究蛋白質在植物細胞中的亞細胞定位,具有簡單、和通用性的特點。

武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司；利用農介導植物瞬時表達侵染本氏和洋蔥表皮細胞,觀察GFP熒光表達情況。公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺；可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。

柑橘潰瘍病是由地毯草黃單胞柑橘致病變種(Xanthomonas axonopodis pv.citri,Xac)引起的一種病害,可影響大部分的商業柑橘栽培品種,造成嚴重的經濟損失。選育抗病品種是解決該病害問題的根本途徑,其中,利用基因工程將抗病基因導入栽培品種是解決柑橘病害的一條快速而有效的途徑。WRKY轉錄因子和病程相關蛋白(pathogenesis-related proteins,PRs)在植物抗病信號調控途徑中起著重要作用。鈣依賴而鈣調素不依賴的蛋白激酶(calcium-dependent/calmodulin-independentproteinkinases,CDPKs)是一類僅在植物和部分原生生物中存在的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,在鈣信號轉導中具有重要功能。本研究根據柑橘潰瘍病高感品種紐荷爾臍橙(Citrus sinensis(L.)Osbeck)和高抗品種四季橘(Citrus madurensis)受潰瘍病侵染后的轉錄組數據,篩選了在這兩個品種中表達差異顯著的24個WRKY和4個PR基因進行研究,在此基礎上,詳細研究了4個WRKY基因和2個PR1基因在柑橘潰瘍病抗性中的功能和作用。具體研究結果如下:1.候選基因的和生物信息學分析了Cs WRKY22、Cs WRKY50、Cs WRKY72-1、Cs WRKY72-2、和Cs PR1-1、Cs PR1-2的編碼序列,ORF分別為921bp、480bp、1809bp、1767bp、501bp和480bp。用MEGA5.2軟件分析其與其他植物同家族蛋白氨基酸序列的親緣關系,并構建進化樹。發現Cs WRKY22與可可WRKY29,Cs WRKY50與棗WRKY50,Cs WRKY72與可可WRKY72,Cs PR1-1與可可PR-1,Cs PR1-2與龍眼PR-1的親緣關系較近。