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發(fā)布時間:2021-08-10 22:17  
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親和柱原理介紹
親和層析(IAC)可稱為色譜技術(shù),是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將抗、惰性微珠共價結(jié)合,然后裝入小柱,將被測溶液流過親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,然后用洗脫緩沖液洗脫抗原(被測物),從而得到純化的抗原(被測物),收集的抗原樣品液可直接用于 HPLC 分析或處理后用熒光光度計檢測。
親和柱介紹
生物分子之間的親和識別包括抗體和抗原、酶和底物和受體等之間的親合作用,這些親和作用屬于生物專一性識別;此外,某些物質(zhì)和生物大分子之間還有一些特異性作用,如染料和某些酶(特別是脫氫酶和激酶等),植物凝集素和糖蛋白,金屬離子和蛋白質(zhì)表面的組氨酸等之間的作用,都可以應用于親和分離過程。
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雙酚A檢測新方法——親和柱凈化-液相色譜法
雙酚A,也稱BPA,在工業(yè)上被用來合成聚碳酸酯(PC)和環(huán)氧樹脂等材料。許多科學家發(fā)現(xiàn),雙酚A會發(fā)揮類似雌素的作用擾亂人體內(nèi)的代謝過程。。我國、歐盟、美國等都禁止其用于嬰幼兒奶瓶。但目前對于雙酚A的檢測前處理僅有少量文獻報道,均采用簡單的萃取、濃縮或SPE固相萃取柱凈化。中檢維康研發(fā)團隊將專一性強、穩(wěn)定性高的層析技術(shù)應用于雙酚A檢測,力圖簡化樣品前處理,提高檢測靈敏度及凈化效果。
雙酚A親和柱能夠特異性的純化樣品中的雙酚A,將樣品溶液通過親和柱時,雙酚A鍵合在親和柱中的上。用蒸餾水將雜質(zhì)淋洗去除。將凈化、濃縮后的雙酚A從上分離下來。然后,注入HPLC或LC-MS進行測定。
親和柱親和層析技術(shù)原理
IAC也是色譜技術(shù)的一種,可稱為色譜技術(shù),是一種利用抗原特異性可逆結(jié)合特性的SPE技術(shù),根據(jù)抗原的高選擇性,從復雜的待測樣品中提取目標化合物。主要原理是將與惰性微珠共價結(jié)合,然后裝柱,將抗原溶液過親和柱,而非目標化合物則沿柱流下,然后用洗脫緩沖液洗脫抗原,從而得到純化的抗原,用適當?shù)木彌_液和合適的保存方法,柱可以再生備用。其提純效率很高,通常只需一次就可達到1000~10000倍的純化效果(王澤永,2002)。
