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發(fā)布時(shí)間:2020-11-17 09:21  
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PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)后的質(zhì)量控制存在缺陷
實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制分為:室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量控制。
室內(nèi)質(zhì)量控制是指實(shí)驗(yàn)室人員通過(guò)一定的步驟方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室工作的可靠性進(jìn)行持續(xù)評(píng)估,旨在監(jiān)控常規(guī)實(shí)驗(yàn)室工作的精度,提高實(shí)驗(yàn)室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗(yàn)的一致性,以確定測(cè)定結(jié)果是否可靠及可否發(fā)出報(bào)告的一項(xiàng)工作。
實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)量控制是指客觀比較實(shí)驗(yàn)室測(cè)量結(jié)果與目標(biāo)值之間的差異,并由外部機(jī)構(gòu)采取一定措施方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果進(jìn)行持續(xù)、客觀的評(píng)價(jià)。
PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)完成,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)過(guò)程中易發(fā)生污染產(chǎn)生污染主要有以下4個(gè)原因:
① 這也是常見(jiàn)的污染原因。重復(fù)擴(kuò)增后,PCR產(chǎn)物的粘貼遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)PCR的檢測(cè)限制,所以即使是少量的污染也足以造成假陽(yáng)性結(jié)果。
② 試劑的污染。在試劑的配制過(guò)程中,接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導(dǎo)致試劑被污染。
③ 待測(cè)樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染;其次在核酸提取過(guò)程中使用了被污染的移液器或槍頭導(dǎo)致樣品被污染;另外,某些樣品中含有病毒,若彌散到空氣中則有可能形成交叉污染。
④ 氣溶膠污染。如果氣溶膠中含有的病毒等污染物擴(kuò)散到空氣中,很有可能造成PCR產(chǎn)物的污染。氣溶膠是由空氣和液體表面的摩擦產(chǎn)生的,打開(kāi)蓋子,搖動(dòng)反應(yīng)管,污染采樣器反復(fù)吸取樣品,就會(huì)形成氣溶膠,造成交叉污染。據(jù)計(jì)算一個(gè)氣溶膠顆粒可含48 000 拷貝,因此,應(yīng)尤其重視由氣溶膠導(dǎo)致污染的問(wèn)題。PCR 實(shí)驗(yàn)室只要出現(xiàn)了污染,之前的結(jié)果報(bào)告就變?yōu)闊o(wú)效而且也無(wú)法進(jìn)行其他的實(shí)驗(yàn)操作。需要找出并清除污染源,才能得到準(zhǔn)確有效的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
以上就是為大家介紹的關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)中產(chǎn)生污染的四個(gè)原因,因?yàn)閷?shí)驗(yàn)室要求無(wú)菌的特殊環(huán)境,所以我們?cè)诟鱾€(gè)細(xì)節(jié)都需要注意,嚴(yán)謹(jǐn)觸碰安全底線。
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PCR實(shí)驗(yàn)室也是基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室,主要功能是擴(kuò)增病毒中所含的基因,檢測(cè)含量低的感ran者是否含有特異性的病毒。傳統(tǒng)PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局為四個(gè)工作區(qū),即試劑制備區(qū)、樣品制備區(qū)、基因擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū),氣流設(shè)置無(wú)負(fù)壓要求。TMOON移動(dòng)新冠PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)在傳統(tǒng)PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的基礎(chǔ)上,合并了基因擴(kuò)增區(qū)與產(chǎn)物分析區(qū),稱為擴(kuò)增分析區(qū),根據(jù)《醫(yī)學(xué)生物安全二級(jí)實(shí)驗(yàn)室建筑技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)》T/CECS662G20要求,擴(kuò)增分析區(qū)生物安全實(shí)驗(yàn)室等級(jí)要求為二級(jí),防護(hù)等級(jí)為三級(jí),氣流需要按照負(fù)壓模式。
由于新冠病毒的肆nue,這種實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)就顯得尤為重要了,它可以為醫(yī)學(xué)人員的相關(guān)研究提供有力的保障!
PCR實(shí)驗(yàn)過(guò)程中易發(fā)生污染
① PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的污染。這也是較常見(jiàn)的污染原因。PCR產(chǎn)物經(jīng)反復(fù)多次的擴(kuò)增,其粘貼量遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)PCR的檢測(cè)限度,所以即使是很微量的污染也足以造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果假陽(yáng)性。
③ 待測(cè)樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴(yán)導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染;其次在核酸提取過(guò)程中使用了被污染的移液器或槍頭導(dǎo)致樣品被污染;另外,某些樣品中含有病毒,若彌散到空氣中則有可能形成一種交叉污染。