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              廣州液相色譜儀費用服務為先「創(chuàng)新通恒」

              發(fā)布時間:2021-09-27 16:39  

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              視頻作者:北京創(chuàng)新通恒科技有限公司







              樣品如果溶解度太低如何上制備HPLC?

              (1)了解一下樣品的性質,根據(jù)其酸堿性,極性等性質,通過調節(jié)溶劑的pH值等,以達到較好的溶解度。

              (2)樣品可能某種晶型難溶,這樣可以加入其他溶劑以助溶。

              (3)不是一定要用流動相來溶解樣品,對溶解度差的樣品,可以選擇甲醇,THF或DMSO等溶解樣品。特別是DMSO,對一般的化合物溶解度都很好。并且在反相柱上不保留,不會造成干擾。而且DMSO的洗脫能力很弱,一般不會影響峰型。

              (4)可以固體上樣。




              多肽的分離制備,如何上量?如何增大分離度?

              反相HPLC應當是很好的分離小肽方法,用CH3CN或CH3OH:H2O(95:5)做流動相,看保留如何,若無保留,建議改用其他色譜方法進行分離。

              關于多肽的分離,首先要知道它的分子量大小,然后選擇不同類型的填料,如孔徑的大小。我們先在分析柱(4.6mm內徑)上做一下實驗,找到很大的分離度,這一過程的難度是很大的,要不斷地改變流動相和固定相,然后再線性或非線性放大到制備,放大的倍數(shù)按分析柱的實驗結果。分離后可以通過冷凍干燥得到固體。

              還可以考慮離子交換來分l離。





              制備色譜

              制備色譜是以分離出純物質為目的的色譜系統(tǒng),分析色譜是以分析出樣品組分信息為目的的色譜系統(tǒng),基于他們目的的不同,制備色譜相對于分析色譜有很多不同特征,不能簡單等同。

              當我們在實驗室中想得到納克乃至毫克級的純物質時,稍微改裝下分析型色譜系統(tǒng)就能簡單輕松的完成,不過,若所需制備的純品量很大,此時,再用分析型色譜系統(tǒng)分離純化,可以預見這將是一場“災難”。

              制備色譜常用的色譜模式有低壓,中壓,高壓三種,以應對不同類型和不同純度要求的樣品的分離,同時盡可能減少成本。




               制備色譜儀分類有多種  

              1、按流動相物理狀態(tài)可分:制備型氣相色譜儀、制備型液相色譜儀和制備型超臨界流體色譜儀。  

              2、按分離模型可分:制備型線性色譜儀和制備型非線性色譜儀。  

              3、按分離對象的屬性可分:制備型有機色譜儀和制備型無機色譜儀。  

              4、按固定相物理狀態(tài)可分:制備型氣液色譜儀、制備型氣固色譜儀、制備型液液色譜儀和制備型液固色譜儀。  

              5、按用途可分:制備型生物色譜儀、制備型制藥色譜儀、制備型化工色譜儀、制備型食品色譜儀、制備型菌體色譜儀等。



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