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發布時間:2020-09-08 14:27  
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PCR實驗室是分子診斷的基礎,也是進行PCR實驗的必備場所。近些年,分子診斷行業快速發展,對PCR的認識又進入到了一個新的階段,但是基于實驗室的基本知識仍然是非常重要的一環。
PCR實驗室注意事項——標本制備區
由于在樣本混合、核酸純化過程中可能會發生氣溶膠所致的污染,可通過在本區內設立正壓條件,避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。
PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區
用過的吸頭也必須放至1 mol/L HCl中浸泡后再放到垃圾袋中按程序處理,如焚燒。由于本區有可能會用到某些可致基因突變和有毒物質,故應當注意實驗人員的安全防護。
PCR實驗室注意事項——擴增區
為避免氣溶膠所致的污染,應當盡量減少在本區內的走動。必須注意的是,所有經過檢測的反應管不得在此區域打開。
PCR實驗室注意事項——擴增產物分析區
本區是主要的擴增產物污染來源,因此必須注意避免通過本區的物品及工作服將擴增產物帶出。在使用PCR-ELISA方法檢測擴增產物時,必須使用洗板,廢液必須收集至1 mol/L HCl中,并且不能在實驗室內傾倒,而應當至遠離PCR實驗室的地方棄掉。
PCR實驗室通風系統及壓力控制
PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求,但是為避免各個實驗區域交叉污染的可能性,宜采用全送全排的氣流組織形式,嚴格控制送、排風的比例以保證各實驗區的壓力要求。
PCR實驗室工作基本原則
實驗室的清潔應當按試劑貯存和準備區→標本制備區→擴增區→擴增產物分析區的方向進行。不同的實驗區域應當有其各自的清潔用具以防止交叉污染。
PCR實驗室布局
不同功能的工作區應是分隔獨立的,各工作區有明顯的標志,不能直通,如果緊密相連,需安裝物品傳遞窗。前兩區為擴增前區,后兩區為擴增后區,擴增前區與擴增后區應嚴格分開。
PCR實驗室各區功能及主要設備
擴增區:主要進行DNA擴增。此外,已制備的DNA模板 (來自樣品制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑準備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。本區主要設備有:擴增儀、冰箱、離心機、加樣器等。