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              亞細胞定位服務公司優選商家【邁斯普】

              發布時間:2020-12-25 07:43  

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              武漢邁斯普生物科技有限公司是一家專業從事生物醫學技術服務、技術咨詢及產品開發的生物技術服務企業。公司坐落于武漢光谷,由3位歸國博士領銜創辦。公司長期致力于建立并完善多項基礎生物技術服務平臺?,F憑借自身技術特色,依托光谷生物城技術產業優勢,面向全國提供的生物技術服務。依據對亞細胞分布的度不同,亞細胞定位的實驗設計也分成簡化型亞細胞定位分析和內參型共定位分析。


              注意: 1、不建議將爬片泡酸后高壓滅菌,首先玻片太薄高壓容易使玻片變形,其次濕滅很容易使玻片上留下水漬影響細胞貼壁;

                 2、接細胞時控制合適的細胞量,避免收樣時細胞量過度擁擠甚至打堆影響結果的觀察。


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              GFP,實際是給你要研究的物質加上標記,在此相當于報告蛋白1653的作用。使用GFP必須構建融合蛋白載體,并在轉染之后有效表達。亞細胞定位要研究蛋白質的細胞定位,是在外面完成的一種實驗,不能再體內蛋白質細胞中完成,所以,研究的成本比較高,對專業知識的要求比較高。這樣,若在熒光顯微鏡下看到細胞內某一部位存回在GFP信號,說明和GFP融合的蛋白也存在于該部位,這樣就達到了確定某答物質亞細胞定位的目的。



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              1)將融合基因(待測植物蛋白質基因-報告基因)克隆到植物表達載體,得到重組表達載體;2)將重組表達載體轉化農,得到重組農;3)向重組農中加入農侵染緩沖液,調節OD600為0.1~0.3,20-25℃靜置1-2h,得到侵染菌液;1)將融合基因(待測植物蛋白質基因-報告基因)克隆到植物表達載體,得到重組表達載體。4)用針頭在植物葉片上避開葉脈扎孔,用無針頭將侵染菌液從扎孔處注射至植物葉片內;5)培養植物2天,從注射部位取1-2cm2葉片;根據報告基因檢測待測植物蛋白質在植物中的亞細胞定位。實驗證明,本方法具操作簡單、快速、標記效果好、重復性好的優點;還可用于基因表達調控及內含子功能研究等,對研究新基因功能和表達調控奠定了技術基礎。


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              確定亞細胞定位有多種方法,其中較常見的是目的蛋白與Marker的熒光雙染,然后用熒光顯微鏡來觀察。蛋白質的亞細胞定位實驗本質上是熒光雙染技術,也可以結合生物信息學方法預測蛋白質的亞細胞定位。


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