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              發(fā)布時(shí)間:2020-12-31 05:54  

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              在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對(duì)動(dòng)物介質(zhì)膽jian堿酯酶正常功能有抑制作用,從而達(dá)到殺蟲(chóng)目的,其抑制率與農(nóng)yao藥的濃度呈正相關(guān)。酶抑制法,是研究最成熟、應(yīng)用最廣泛的快速農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù),主要根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對(duì)乙酰膽jian堿酶的特異性抑制反應(yīng)。正常條件下,膽jian堿酯酶(ChE)催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物類似物水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑發(fā)生反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)或農(nóng)殘測(cè)試儀在412nm處測(cè)定吸光度的變化值(△A),計(jì)算出抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥殘留的存在。酶活力:空白對(duì)照1分鐘(3分鐘)吸光度變化值(ΔΑ0)在0.15-0.3(0.3-0.8)之間。


              分析法,主要有分析和酶分析,常用的是酶聯(lián)分析(ELISA),基于抗原和抗ti體的特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng),對(duì)于小分子量農(nóng)yao藥需要制備人工抗原,才能進(jìn)行分析。酶抑制法,是研究成熟、應(yīng)用廣泛的快速農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù),主要根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)yao藥對(duì)乙酰膽jian堿酶的特異性抑制反應(yīng)。薄層色譜法(ThinLayerChromatogra2phy,TLC)是一種較成熟的、應(yīng)用也較廣的微量快速檢測(cè)方法,20世紀(jì)60年代色譜技術(shù)的發(fā)展,使薄層色譜法在農(nóng)yao藥殘留分析中得到廣泛應(yīng)用。檢測(cè)法,主要利用生物對(duì)農(nóng)yao藥殘留的敏感反應(yīng),例如給家蠅喂食樣品,觀察率來(lái)判定農(nóng)殘量。該方法操作簡(jiǎn)單,但定性粗糙、準(zhǔn)確度低,對(duì)農(nóng)yao藥的適用范圍窄。


              樣品前處理及對(duì)照液、檢測(cè)樣品液的制備:

              1) 對(duì)照液的制備:取酶100ul,蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀,緩沖液2.5ml,加入專用反應(yīng)瓶中,混勻,再加入顯色劑100ul,底物20ul。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘?jiān)噭湃雰x器進(jìn)行對(duì)照測(cè)試。

              2) 檢測(cè)樣品液的制備:

              a.取2g茶葉樣品放入三角瓶中,加入10ml緩沖液,快速農(nóng)藥殘留檢測(cè)儀, 振蕩提取2分鐘后過(guò)濾,取出清液即為待測(cè)試液。

              b.取酶100ul,待測(cè)試液2.5ml,加入專用反應(yīng)瓶中,混勻靜置抑制10分鐘后,(按儀器顯示的時(shí)間計(jì)時(shí))加入顯色劑 100ul,底物 20ul 。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中農(nóng)殘?jiān)噭?