您好，歡迎來到易龍商務網！
發布時間：2021-10-28 04:18
【廣告】
低溫生物知多少？
實驗室的傳代保藏過程
1. 按說明書要求復溶菌粉，轉種于適當的增菌培養基內（G1），復壯后轉接至平板上，并于適當溫度下培養適當時間，分離出單個純種菌落，此為第2代（G2）。
2. 鑒定完成后，挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管，同時挑取純菌落轉接斜面作為工作用。此時，保藏為第2代，但工作用則為第三代。
3. 將第2代管冷凍保存，將工作用于適當溫度下培養適當時間后可用于試驗。
4. 取一支冷凍保存的G2代轉種于平板和斜面培養基上，平板上的制成冷凍保藏管第三代（G3），斜面培養基經適當溫度下培養適當時間后用作工作用（W3）。
5. 將第三代（G3）冷凍或低溫保存，將生長、轉種后的G2經滅菌處理后丟棄。
6. 當工作用代數小于5時，可直接用上一代工作用轉接下一代工作用，如W3可直接轉接為W4。
7. 按上述程序操作，直至G4轉為W5為止，需重新開啟安瓿，再重復上述操作程序、保藏和使用。
以上方法中，被分為兩類。傳代用和工作用，傳代用用于甘油冷凍管法保藏，工作用用斜面低溫保藏法保藏。
實驗證明，甘油冷凍管的有效期至少為2年，但其主要適用于細菌（需氧）、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應用其它方法。
低溫生物產品特性
自古以來生物的產品具有高選擇性、高轉化率和高轉化速度的特性，可以在常溫、低壓或中壓的發酵條件下進行生產。該產品還具有以下特點：
1、易工程化：采用通用性強的發酵工藝和設備，適應規模化生產；
2、高度靈活：代謝對H?/CO/CO?沒有比例要求；
3、條件溫和：常溫、低壓或中壓等溫和條件下操作；
4、耐受性高：抗雜菌、對硫化物等常規雜質具有較強耐受性；
5、高經濟性：生產項目建設投資低，1-2年可收回建設投資，投資回報率高；
6、綠色生產：利用H?、CO和CO?氣體，固定二氧化碳, 節能減排降污染，能耗低，低水耗，環境友好。
低溫生物菌種純化方法
1、傾注平板法
首先把微生物懸液通過一系列稀釋，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40~50°左右的營養瓊脂培養基充分混合，然后把這混合液傾注到無菌的培養皿中，待凝固之后，把這平板倒置在恒箱中培養。單一細胞經過多次增殖后形成一個菌落，取單個菌落制成懸液，重復上述步驟數次，便可得到純培養物 2、涂布平板法
首先把微生物懸液通過適當的稀釋，取一定量的稀釋液放在無菌的已經凝固的營養瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃刀把稀釋液均勻地涂布在培養基表面上，經恒溫培養便可以得到單個菌落。3、平板劃線法
簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。用無菌的接種環取培養物少許在平板上進行劃線。劃線的方法很多，常見的比較容易出現單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、四格法等。當接種環在培養基表面上往后移動時，接種環上的菌液逐漸稀釋，然后在所劃的線上分散著單個細胞，經培養，每一個細胞長成一個菌落。
2、富集培養法
富集培養法的方法和原理非常簡單。我們可以創造一些條件只讓所需的微生物生長，在這些條件下，所需要的微生物能有效地與其他微生物進行競爭，在生長能力方面遠遠超過其他微生物。所創造的條件包括選擇合適的碳源、能源、溫度、光、pH、滲透壓和氫受體等。在相同的培養基和培養條件下，經過多次重復移種，然后富集的菌株很容易在固體培養基上長出單菌落。如果要分離一些專性寄生菌，就必須把樣品接種到相應敏感宿主細胞群體中，使其大量生長。通過多次重復移種便可以得到純的寄生菌。
