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發布時間:2021-10-23 04:06  
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排氣泡注意事項
排泡時,一般排除1/3柱體體積的溶劑即可排除填充物中的氣泡,切記不可將溶液排干。防脫水,手動排氣泡速度不易過快,但也不能過慢,過慢的速度可能無法排出較大的氣泡。
要是激1活平衡液不小心排干了怎么辦?只需再加入活化溶劑,使之成為氣泡。
適當地排除氣泡可以在一定程度上避免過慢或流速不穩定的情況。那么我們的恢復,平衡性能不能得到保證?有一種神奇的小操作,就是在做完這兩個步驟后抽干,這樣我們就可以得到更好的實驗結果。
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固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱 SPE)是20世紀70年代中期發展起來的樣品前處理技術,其用途廣泛,并日益受到人們的歡迎。按其不同的吸附填料和吸附機理,主要分為正相、反相、離子交換和混合固相萃取小柱。正相、反相固相萃取小柱主要用于萃取極性和非極性化合物,而對某些帶電物質(離子化合物)的萃取回收率較低,例如C18固相萃取小柱,當目標化合物處于離子狀態時,C18對該化合物的能力因子顯著降低。
離子化固相萃取技術適合于分解為帶電離子的化合物,其作用機制是在帶電的目標化合物離子和帶電離子相反的吸附劑之間產生靜電吸引。試樣基質可以是極性的,例如水溶液,也可以是非極性的有機溶液,但實際使用時用水溶液較多,如生物體液、江河湖海等天然水、廢水等。
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反相萃取分離主要是利用固相萃取材料官能團與目標化合物碳氫鍵之間的非極性作用力。反相非極性的 SPE柱通常更適合從極性基質中提取分離出非極性和中等極性的目標化合物。對利用非極性作用力吸附于非極性 SPE柱的目標化合物,可用氯i仿、環i己烷、乙i酸乙i酯等具有非極性的溶劑洗脫。當溶劑的洗脫強度足夠大,可以使目標化合物與吸附劑非極性基團間的范德華力不受影響時,使其在 SPE柱中順利洗脫。即使是極性更強的甲i醇,對許多化合物而言,也有足夠的非極性力量來洗脫它。有時候,單種溶劑無法完全洗脫疏水性的目標化合物,可以考慮使用二氯甲i烷:乙i酸乙i酯(1:1,體積比)。
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對典型的硅膠基質鍵合反相柱體,在不使用緩沖液的情況下,建議采用下列清洗溶劑系列:甲i醇---乙晴---75%乙晴/25%異丙i醇---異丙i醇---二氯甲i烷---己烷;每種溶劑至少沖洗10個柱體,分析柱的洗滌流速為250 mm×4.6 mm。zui終以10柱體積異丙i醇過渡,然后返回到原始流動相(不含緩沖鹽),zui后返回到初始流動相配置。如使用紫外檢測器,則應避免選擇在紫外區域有吸收作用的溶劑,否則需要使用大量的溶劑沖洗基線,以使基線穩定。四氫呋i喃也是常用的清潔溶劑。如懷疑柱子受到嚴重污染,也可用二甲亞砜(DMSO)或二甲i基胺與水按50:50的比例混合,用流速低于0.5 ml/min的水沖洗色譜柱。
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SPE小柱和色譜柱之間的一個區別是, SPE是一次性消耗品,在耐受溶劑范圍之外,短時間的溶劑洗滌對小柱的保留特性幾乎沒有影響,而且不會造成保留的顯著差異,因此它使用的 pH值范圍較寬,一般可在pH值范圍1-10之間使用,而不會造成結果的差異。
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固相萃取(Solid Phase Extraction,簡稱 SPE)是一種將選擇性保留、選擇性洗脫等過程結合在一起的分離技術。
在通過吸附劑(Sorbent)處理復雜樣品時,吸附劑通過極性作用、疏水作用或離子交換等作用力,選擇性地保留了目標物質(Aimed Compound)和少量與目標物質性質相似的組分,而其它組分則通過吸附劑流出小柱,然后以另一種溶劑體系選擇性地洗脫目標物質,實現了目標物質的分離、提純和富集。
固相萃取過程中,“保留”和“洗脫”都受到目標物、吸附劑和溶劑三個因素的影響,對于給定的目標物,選擇合適的吸附劑、樣品溶劑和洗脫溶劑是成功分離的關鍵。
固相萃取術語通用:
吸附劑:固相萃取柱中的一種填料,它能選擇性地從樣品溶液中萃取某些化合物;
吸收能力(Capacity):一定質量的吸附劑,在特定條件下,能保持化合物的總質量(包括目標化合物和部分干擾化合物)。
固體萃取塔:固相萃取柱(Solid Phase Extraction Column,簡稱 SPE柱)是由層析柱發展而來的樣品前處理設備,用于萃取、分離和濃縮。本發明主要用于各種食品、農畜產品、環境和生物樣品中的樣品預處理。固相萃取技術已廣泛應用于眾多國家標準(GB/T)和工業分析標準。
固相萃取柱的選擇必須考慮柱容量。因為我們面對的樣品基質一般比較復雜,比如食物,生物樣品等等。固相萃取中,固相萃取吸附劑在吸附目標化合物的同時,也吸附具有類似性質的雜質。所以,考慮柱容是指目標化合物加可吸附的雜質總量不能超過柱容。結果表明,當載樣時,部分目標化合物可能無法被吸附,從而降低了回收率。