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發布時間：2020-12-29 09:56
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Tris中文品名為三羥；氨基；緩血酸胺；2-氨基-2-（羥）-1,3-丙二醇。是一種白Chemicalbook色結晶或粉末。溶于乙醇和水，微溶于、苯，不溶于、，對銅、鋁有腐蝕作用，有刺激性的化學物質。緩沖特性Tris為弱堿，在25℃下，它的pKa為8.1；根據緩沖理論，Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。TrisChemicalbook堿的水溶液pH在10.5左右，一般加入鹽酸以調節pH值至所需值，即可獲得該pH值的緩沖液。但同時應注意溫度對于Tris的pKa的影響。
表面活性劑是指加入少量能使其溶液體系的界面狀態發生明顯變化的物質，具有固定的親水親油基團，在溶液的表面能定向排列。表面活性劑的應用可分為民用和工業應用。民用表面活性劑中有2/3用于個人保護用品，工業用表面活性劑是民用表面活性劑以外用于各工業領域的表面活性劑總和。表面活性劑的分子結構具有兩親性：一端為親水基團，另一端為疏水基團；親水基團常為極性基團，如羧酸、磺酸、硫酸、氨基或胺基及其鹽，羥基、酰胺基、醚鍵等也可作為極性親水基團；而疏水基團常為非極性烴鏈，如8個碳原子以上烴鏈。Tris含有三個羥基和一個氨基，均為良好的親水基團，因此Tris也是合成表面活性劑的重要中間體。
蛋白制備及純化過程中緩沖液的選擇非常重要，合適緩沖液才能保證蛋白的活性和結構穩定。
當我們純化蛋白時，的就是要保持蛋白在純化過程中不能失活，或者是盡量降低純化過程對蛋白活性帶來的損失。這就意味著蛋白在整個純化過程中要始終保持可溶性和活性。
因此設計一個防止蛋解和聚合的蛋白純化緩沖體系就非常重要了，尤其會凸顯在實驗結果上。在設計緩沖buffer時應考慮以下幾個因素：pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩定劑。其中每一個因素都要根據你的目的蛋白進行優化，并以目的蛋白的活性作為優化的評估標準。
很多實驗的pH值設定在 7.4以模仿生物條件。假如你的蛋白在這個pH值下是穩定的，那就非常棒了！如果不是，就需要改變pH值找到目的蛋白在溶液中處于可溶性且不會降解的狀態。
一個經驗法則是：蛋白在它等電點pI附近的pH值溶液中會表現得不易溶解，因為蛋白在其等電點的pH值溶液中表面沒有凈電荷，從而容易聚集。這里推薦用Expasy的ProtParam工具快速簡便地計算蛋白等電點pI值，只要提交蛋白序列即可。
