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等溫核酸試劑盒

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重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)是近年來(lái)建立起的一種新的核酸恒溫?cái)U(kuò)增技術(shù)，具有操作簡(jiǎn)單、靈敏度高、特異性強(qiáng)、可在短時(shí)間內(nèi)快速擴(kuò)增出目的片段等優(yōu)點(diǎn)，在動(dòng)物疾病早期診斷、現(xiàn)地檢測(cè)、進(jìn)出口快速檢疫等方面具有良好的應(yīng)用前景。

重組酶與引物結(jié)合形成的蛋白-DNA復(fù)合物，能在雙鏈DNA中尋找同源序列。一旦引物定位了同源序列，就會(huì)發(fā)生鏈交換反應(yīng)形成并啟動(dòng) DNA合成，對(duì)模板上的目標(biāo)區(qū)域進(jìn)行指數(shù)式擴(kuò)增。被替換的 DNA鏈與SSB結(jié)合，防止進(jìn)一步替換。在這個(gè)體系中，由兩個(gè)相對(duì)的引物起始一個(gè)合成事件。

等溫核酸試劑盒應(yīng)用

一種基于CRISPRCas的常溫等溫快速檢測(cè)核糖核酸的技術(shù)及檢測(cè)方法.本發(fā)明旨在生物體外利用公開(kāi)的多種基因工程酶與化學(xué)組分進(jìn)行核糖核酸擴(kuò)增,并通過(guò)一種或多種核酸酶,在常溫等溫條件下實(shí)現(xiàn)快速,一步或兩步的完成特定核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)的擴(kuò)增與檢測(cè)過(guò)程,使對(duì)各種核酸的檢測(cè)更快速和更簡(jiǎn)便.包括以下步驟:(1)通過(guò)核酸提取得到待檢測(cè)樣本的RNA或單鏈DNA或雙鏈DNA;(2)利用逆轉(zhuǎn)錄酶,轉(zhuǎn)錄酶,核糖核酸酶H,CRISPR相關(guān)蛋白13的組合酶以及核酸熒光探針與待檢核酸在等溫進(jìn)行反應(yīng),若待檢測(cè)核酸為DNA,在反應(yīng)前增加預(yù)變性的步驟;(3)通過(guò)檢測(cè)熒光信號(hào),判斷待檢測(cè)樣本中是否存在目標(biāo)核酸。