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發布時間：2020-10-30 05:08
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廣州聯方實驗器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區，是集技術和銷售于一體的企業。推薦色譜柱——賽分GP-C18色譜柱正相柱:填料是極性的，官能團為,CNqing基、,NH2氨基等。聯方的創始人在美國紐約留學，歸國創立了聯方。中西結合的管理理念，自強不息、開拓進取、勤勉擔當，致力于把聯方打造成一個百年品牌、一個z專業的一站式實驗室采購平臺，追求質量、追求服務、追求和創新。科學化、精細化、專業化。 我們有及時的送貨服務，準確而快捷地滿足您的需要。公司主營：Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等等
液相色譜柱選擇方法|液相色譜柱選擇的條件
A填料基質
1.硅膠基質：純度高本錢低，強度大，化學修飾輕易，但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩定，但經過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。推薦色譜柱：BR-C18色譜柱（pH1.5-10.5范圍）
2.聚合物基質：應用pH值范圍寬，溫度穩定(高溫可以達到80度以上)，機械強度小。
B顆粒外形
大多現代HPLC填料都是球形顆粒，但有時是不規則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩定性以及較長的柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。
C顆粒粒徑
粒徑越小柱效越高、分離度越高，但同時會導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
D含碳量
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例，與比表面積和鍵合覆蓋度等有關。在做柱性能測試時要按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是z佳條件)，只有這樣，測得的結果才有可比性。高含碳量進步柱容量、分辨率及分析時間，用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時間短、展現不同的選擇性，用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。推薦選擇賽分C18色譜柱。不管你需要做什么樣品，都能夠滿足你的分離條件
E孔徑和比表面積
HPLC吸附介質是多孔的顆粒，盡大多數的反應表面于孔內。因此，分子必須進進孔內才能被吸附和分離。
孔徑和比表面積是相輔相成的兩個概念。孔徑小比表面積大，反之亦然。比表面積大，增加樣品與鍵合相之間的反應，增加保存,上樣量和復雜成分的分離度;比表面積小，平衡時間快，適合梯度分析。
F孔容和機械強度
孔容，又稱“孔體積”。系統壓力高，可能會因溶劑泵中的過濾頭供液速度跟不上而導致氣泡進入系統，停機也應該是因為氣泡進入壓力下降的原因，可考慮更換液體通量更大的過濾頭。指單位顆粒的空隙體積大小。它能很好的反應填料的機械強度。孔體積大的填料相對孔體積小的填料機械強度要略弱。孔體積為1.5mL/g或更小的填料大多用于HPLC分離，而孔體積大于1.5mL/g的填料使用于尺寸排阻色譜和低壓色譜。
G封端封端
封端能夠降低極性堿性化合物由于與luo露的硅醇基相互作用而產生的拖尾峰。不封端鍵合相相對封端鍵合相會產生不同的選擇性，尤其是極性樣品。
Kinetex液相色譜柱-從 UHPLC 到 HPLC 再到 PREP LC 的完整可擴展解決方案
難以置信的 UHPLC
柱效與性能
柱效可比全多孔 1.7 μm
色譜柱高 20 %
在 HPLC 和 UHPLC 系統
上實現亞 2 μm 級性能
立即改善您需要 3.5 μm 粒
徑的藥典（歐洲藥典和美
國藥典）方法
在 5 μm 壓強下可以為
HPLC 和 PREP LC 方法實
現 3 μm 或更佳的柱效
比全多孔顆粒更優的性能
使用包含納米結構技術的溶膠凝膠處理技術，在固態硅膠核上培養出均一穩定的多孔外殼。這一高度優化的工藝與行業ling先的色譜柱填裝技術相結合，催生了可以生成極高塔板數的高度可重現色譜柱。
廣州聯方實驗器材有限公司主營：Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產需要的化學試劑、玻璃儀器、實驗器材和生物耗材，是全方面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴謹、務實、創新的創業精神，為您提供價格優惠、質量保證的產品。我們有及時的送貨服務，準確而快捷地滿足您的需要。注意使用溶劑的次序不要顛倒，用jia醇沖洗完后，再以相反的次序沖洗至正己烷，所有的流動相必須嚴格脫水。創業的路上我們風雨同舟，一份耕耘就有一份收獲
更換液相色譜柱該注意哪些問題？
色譜柱作為色譜儀分析系統中的分離單元，色譜柱的分離度對于色譜儀檢測分析速率的快慢以及檢測結果的準確性起著至關重要的作用影響色譜柱分離度的因素有很多，除了色譜柱自身的性能參數外，在使用液相色譜儀色譜柱分析過程中，尤其要注意的是柱外效應對分析結果的影響
那么，什么是柱外效應？柱外效應又是如何造成的呢？液相色譜柱基本構造柱管、壓帽/卡套、篩板(濾片)、接頭分析型常規分析柱窄徑柱(1。?所謂柱外效應是指除色譜柱自身性能之外造成色譜峰展寬的因素,其主要由進樣裝置檢測器以及它們與色譜柱之間的連接管路死體積所造成造成柱外效應的原因是樣品分子在液體流動相中的擴散系數比在氣體中小4~5個數量級，液體流動相的流速也比氣相慢1-2個數量級因此，樣品進入色譜柱后，在柱子以外的任何死體積（進樣器柱接頭連接管檢測器）中，樣品分子的擴散和滯留，都會引起色譜峰的展寬，而使柱效降低
為使柱外效應減至z小，使檢測結果更加準確，液相色譜儀各裝備的管路連接非常重要一般而言，液相色譜儀的次安裝都是由色譜儀廠家技術員安裝完成的，整個液相色譜儀及其配套裝備都是安裝的很的客戶后期在更換色譜柱要注意的問題是接頭的處理，一般柱子入口和出口接頭為不銹鋼卡套接頭，當完成次安裝后，不銹鋼卡套已固定死，因此，早更換色譜柱時應當注意的問題是柱子接頭處的形狀和長度，否則會產生一個非常大的死體積
更換色譜柱的操作方法是先用95%yi腈 5%水沖洗舊柱子（沖去柱子中殘留的緩沖鹽和之前難以洗脫的組分），關掉流速，待流速降至0后，把柱子兩邊的PEAK頭擰下來，用配套的塞子將換下的柱子兩頭堵上，密封保存更換新的色譜柱時，應先將需換上的柱子兩邊的塞子旋開，確定好柱子標示的方向后，先接柱子入口端，并使柱子出口端略高于入口端，這樣就使流動相流過柱子時能將其中的氣泡排出，待氣泡排盡后，再接上柱子的出口端，用純的yi腈小流速沖洗半小時，再用流動相按0.2， 0.5， 1.0逐漸加大流速來沖洗
LuxAMP 手性液相色譜柱
對尿液中的jia基ben丙胺和ben丙胺對映體進行快速、準確的手性分離
Lux 3μm AMP 是一款專為ben丙胺和取代ben丙胺（包括jia基ben丙胺）的手性分析而開發和測試的獨特液相色譜填料。一旦確定樣品中存在ben丙胺或jia基ben丙胺，便可輕松實現對映體確認。
不受常見干擾物的影響
Lux 3μm AMP 的另一個顯著優勢是，在分離ben丙胺和jia基ben丙胺對映體時不會受到下列常見的zhi療和成分的影響。此外，LuxAMP 色譜柱的分離能力也有助于分離取代ben丙胺的對映體
廣州聯方實驗器材有限公司主營：液相色譜柱，Kinetex色譜柱，Gemini色譜柱，Synergi色譜柱，Luna色譜柱等等。我們不斷追求，通過自身的不斷完善，可以為您提供實驗室和生產需要的玻璃耗材、標準物質、實驗器材、色譜耗材和生物耗材，是quan面的實驗室一體化采購平臺。我們本著嚴謹、務實、創新的創業精神，為您提供價格優惠、質量保證的產品。我們有及時的送貨服務，準確而快捷地滿足您的需要。曾經也有很多同學和我聯系討論色譜柱的清洗和再生，所以我之前寫了一篇關于色譜柱的清洗欠你們的色譜柱清洗再生方法來了）。
GeminipH 靈活性強的液相色譜柱
維生素 B3
色譜柱： Gemini 3 μm C18
規格： 100 x 4.6mm
貨號： 00D-4439-E0
流動相： A：0.1% 甲酸的水溶液
B：jia醇
流速： 0.6mL/min
溫度： 22 °C
檢測： 電噴霧質譜 (ESMS) (22 °C)
檢測器： SCIEX API 4000 系統
樣品： 1. 煙酰胺
2. 煙酸
TMP 和硫胺
色譜柱： Gemini 3 μm NX-C18
規格： 100 x 3.0mm
貨號： 00D-4453-Y0
流動相： A：含 10% jia醇的 25mM Na2
HPO4
(pH 7.0)
B：含 70% jia醇的 25mM Na2
流速： 0.75mL/min
檢測： 熒光（激發：375 nm，發射：435 nm）（室溫）
樣品： 1. TMP
2. 硫胺
手性色譜柱
蛋白質型：
蛋白質型手性色譜柱屬于第5種類型。分離依賴于疏水相互作用和極性相互作用。已經有多種蛋白質用于此類手性色譜柱。目前使用較多的是α-酸性糖蛋白（α-Acid Glycoprotein，AGP），人xue清白蛋白（Human Serum Albumin，HSA），牛xue清白蛋白（Bovine Serum Albumin，BSA）和卵類粘蛋白（Ovomucoid，OV）。低含碳量分析時間短、展現不同的選擇性，用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。
α-酸性糖蛋白分子由181個氨基酸殘基和40個唾液酸（sialic acid）殘基構成。α-酸性糖蛋白分子偏酸性，等電點為2.7。含有兩個二硫鍵，性質很穩定。α-酸性糖蛋白分子可以共價鍵合到硅膠上，制成手性色譜柱，可以分離許多化合物。
α-酸性糖蛋白手性色譜柱使用的流動相通常為pH 4-7的磷酸鹽緩沖液和很小比例的有機相。有機相shou選異bing醇，如達不到分離要求，可以嘗試yi腈，乙醇，jia醇或四氫fu喃。有機相的改變導致蛋白結構發生暫時的改變。色譜柱的負載量至關重要，典型的負載量為0.02mg/ml的濃度樣品，進樣20μl。pH 的改變對手性選擇性起關鍵作用，尤其是胺類化合物。但是我們在拆卸過程中對色譜柱前端填料的損害遠遠大于污染照成的傷害，因為我們不是專業的。pH降低導致蛋白質負電荷的降低，引起胺類化合物保留時間減小，然而這意味著可以減小有機相比例，使選擇性增加，峰形改善。
通過調節有機相比例仍無法達到分離效果時，有時需用電荷調節劑。但這可能引起蛋白結構的yong久改變，這些電荷調節劑包括丁酸、辛酸、癸酸和二jia基辛胺。有時也用到1，2 亞二醇，1，2丁醇和氯化鈉。溫度對分離也有影響，溫度增加保留時間，減小分離因子。G封端封端封端能夠降低極性堿性化合物由于與luo露的硅醇基相互作用而產生的拖尾峰。
人xue清白蛋白（HSA）分子量為69,000，等電點為4.8。蛋白中認為存在兩個結合位點：華法令-氮雜普魯帕宗（warfarin-azapropazone）結合位點。流動相中加入辛酸，采用人xue清白蛋白手性色譜柱可以有效分離benzodiazapine。Warfarin也用人xue清白蛋白手性色譜柱得到了分離，流動相組成為：100mM磷酸緩沖液pH7：yi腈：異bing醇 = 84：10：6。表面積---------顆粒外表面和內部孔表面的總和,以m2/gram表示6。
牛xue清白蛋白（BSA）為球型蛋白，分子量為66,000，等電點為4.7。此蛋白為一個單氨基酸鏈，通過17個二硫鍵形成9個雙環。許多化合物通過牛xue清白蛋白手性色譜柱得到分離。牛xue清白蛋白不如α-酸性糖蛋白穩定，一些有ji溶劑（如yi腈、jia醇）可使蛋白變性，因此使用起來要特別注意。Gemini色譜柱簡介：獨特的選擇性，高結構整體度和高載量的預裝柱以及散裝填料非常適合于分離純化應用。
卵類粘蛋白由蛋清中提取，分子量為55,000。它可分離大量的胺類和酸類化合物。
蛋白手性色譜柱的載樣量均較小。影響了蛋白手性色譜柱在制備色譜中的應用。
蛋白手性色譜柱在所有手性色譜柱中是應用廣的色譜柱，但并不是效果z好的色譜柱。
廣州聯方實驗器材有限公司成立于2005年，位于廣州番禺區，是集技術和銷售于一體的企業。聯方的創始人在美國紐約留學，歸國創立了聯方。中西結合的管理理念，自強不息、開拓進取、勤勉擔當，致力于把聯方打造成一個百年品牌、一個z專業的一站式實驗室采購平臺，追求質量、追求服務、追求和創新。反相色譜中，溶質按其疏水性大小進行分離，極性越大疏水性越小的溶質，越不易與非極性的固定相結合，所以先被洗脫下來。想了解：Luna色譜柱，美國飛諾美色譜柱，Phenomenex色譜柱，手性色譜柱，Lux多糖類手性色譜柱等信息，可聯系廣州聯方實驗器材有限公司
Synergi Max-RP 可在極端 pH 條件下實現重現性和較長的色譜柱壽命
pH 1.5 下的穩定性
應用號：12481
色譜柱： Synergi 4 μm Max-RP
規格： 30 x 2.0mm
貨號： 00A-4337-B0
流動相： A：含 0.1% TFA 的水溶液
B：含 0.1% TFA 的yi腈溶液
梯度： 在 3 分鐘內從 A/B (95:5)
變成 A/B (5:95)
流速： 1.0mL/min
檢測： UV / 254 nm
進樣： 1 μL
溫度： 30 °C
樣品： 沉淀后的豬xue清
（2:1 yi腈:xue清）
內含：
1. 奧沙xi泮 (50 ng)
2. 替馬xi泮 (50 ng)
3. 去甲地xi泮 (50 ng)
4. 地xi泮 (50 ng)
配位交換型：
手性配位交換色譜（Chiral LigandExchange Chromatography，CLEC）Davankov發明，是通過形成光學活性的金屬絡合物而達到手性分離，屬于Irving Wainer分類中的第4類手性固定相，主要用于分離氨基酸類。如果你認為流動相比例無法把色譜柱沖洗干凈或者此比例中有機系占有比例過大，你可以使用內含10%左右的純水來沖洗。
由于此類固定相是由手性氨基酸—銅離子絡合物鍵合到硅膠或聚合物上形成，因此流動相中必須含有銅離子以保證手性固定相上的銅離子不至流失。其它的過渡金屬元素也已用于手性配位交換色譜，但銅離子應用廣。形成絡合物的過程十分緩慢，因此有時需提高柱溫，z佳溫度約50℃。手性配位交換色譜僅對α- 氨基酸和其類似物有效。β- 氨基酸很難用手性配位交換色譜得以分離。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強，應用范圍受到一定的限制，所以未能廣泛應用，新型氧化鋯填料也可用于HPLC，商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱，應用PH范圍1～14，溫度可達100℃。手性配位交換色譜可用于制備，由于流動相中存在銅離子，雖然銅離子能用離子交換柱除去，但增加了樣品處理的困難。
