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發布時間:2021-07-11 14:05  
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拉曼光譜在生物學研究中的應用
拉曼光譜是研究生物大分子的有力手段,由于水的拉曼光譜很弱、譜圖又很簡單,故拉曼光譜可以在接近自然狀態、活性狀態下來研究生物大分子的結構及其變化。
生物大分子的拉曼光譜可以同時得到許多寶貴的信息:
(1)蛋白質二級結構:α-螺旋、β-折疊、無規卷曲及β-回轉
(2)蛋白質主鏈構像:酰胺Ⅰ、Ⅲ,C-C、C-N伸縮振動
(3)蛋白質側鏈構像:苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸的側鏈和后二者的構像及存在形式隨其微環境的變化
(4)對構像變化敏感的羧基、巰基、S-S、C-S構像變化
(5)生物膜的脂肪酸碳氫鏈旋轉異構現象。
(6)DNA分子結構以及和DNA與其他分子間的作用。
(7)研究脂類和生物膜的相互作用、結構、組分等。
(8)對生物膜中蛋白質與脂質相互作用提供重要信息。
拉曼光譜的分析方向
拉曼光譜儀分析技術是以拉曼效應為基礎建立起來的分子結構表征技術,其信號來源與分子的振動和轉動。
拉曼光譜的分析方向有:
定性分析:不同的物質具有不同的特征光譜,因此可以通過光譜進行定性分析。
結構分析:對光譜譜帶的分析,又是進行物質結構分析的基礎。
定量分析:根據物質對光譜的吸光度的特點,可以對物質的量有很好的分析能力。
拉曼光譜技術的優越性
提供快速、簡單、可重復、且更重要的是無損傷的定性定量分析,它無需樣品準備,樣品可直接通過光纖探頭或者通過玻璃、石英、和光纖測量,此外。。。
①由于水的拉曼散射很微弱,拉曼光譜是研究水溶液中的生物樣品和化學化合物的理想工具。
②拉曼一次可以同時覆蓋50~4000波數的區間,可對有機物及無機物進行分析。相反,若讓紅外光譜覆蓋相同的區間則必須改變光柵、光束分離器、濾波器和檢測器。。。
③拉曼光譜譜峰清晰尖銳,更適合定量研究、數據庫搜索、以及運用差異分析進行定性研究。在化學結構分析中,獨立的拉曼區間的強度可以和功能集團的數量相關。
④因為激光束的直徑在它的聚焦部位通常只有0.2~2毫米,常規拉曼光譜只需要少量的樣品就可以得到。這是拉曼光譜相對常規紅外光譜一個很大的優勢,而且拉曼顯微鏡物鏡可將激光束進一步聚焦至20微米甚至更小,可分析更小面積的樣品。
⑤共振拉曼效應可以用來有選擇性地增強大生物分子特個發色基團的振動,這些發色基團的拉曼光強能被選擇性地增強1000到10000倍。