酶聯ELISA試劑盒廠家常用指南「中檢維康」

ELISA試劑盒檢測過程中的注意事項

ELISA實驗通用規則

ELISA試劑盒——會出現的問題及解決辦法

標準曲線線性不佳，或是平行性不好。

a.原因：溫育位置避光不好或受到氣流干擾。

解決辦法： 請確認溫育位置既不透光也不透風(如抽屜內)。

b.原因：操作時間拖太久。

解決辦法：請在方法熟練后再進行操作。

c.原因：微孔間相互污染。

解決辦法： 加樣品時，請小心勿濺出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

d.原因：標準品或酶標記物所加入的量不一致。

解決辦法：請使用已校正過的移液槍，并確保其與吸頭之間有高度密合性。

e.原因：添加樣品或試劑的操作方法不正確。

解決辦法：加樣品或試劑時，吸頭請勿接觸微孔。

f.原因：洗板過程發生問題(如管路堵塞、洗完板后未立刻進行下一步驟)。

解決辦法：請隨時監控洗板過程，洗完后立即進行下一步驟。

ELISA試劑盒主要實驗原理

·包被：抗原或者能以物理性吸附于固相載體表面，原因是蛋白質和聚乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，吸附之后能保持抗原反應等活性；

·標記：抗原或者可通過共價鍵與酶連接成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其活性和酶的催化特點；

·顯色：酶結合物與相應包被在固相載體的抗原或者結合后，也被固定在固相載體上，加入酶的底物之后可出現顯色反應，根據反應的顏色深淺可計算抗原或者的相對含量。