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              原位雜交試劑電話「思特進(jìn)」

              發(fā)布時(shí)間:2021-05-18 08:04  

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              多彩色熒光原位雜交技術(shù)多彩色熒光原位雜交(Multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)是在熒光原位雜交技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新技術(shù),它用幾種不同顏色的熒光素單獨(dú)或混合標(biāo)記的探針進(jìn)行原位雜交,能同時(shí)檢測多個(gè)靶位,各靶位在熒光顯微鏡下和照片上的顏色不同,呈現(xiàn)多種色彩,因而被稱為多彩色熒光原位雜交。它克服了FISH技術(shù)的局限,能同時(shí)檢測多個(gè)基因,在檢測遺傳物質(zhì)的突變和染色體上基因定位等方面得到了廣泛的應(yīng)用(楊明杰等1998)。


              原位雜交是指將特定標(biāo)記的已知順序核酸為探針與細(xì)胞或組織切片中核酸進(jìn)行雜交,從而對特定核酸順序進(jìn)行精3確定量定位的過程。原位雜交可以在細(xì)胞標(biāo)本或組織標(biāo)本上進(jìn)行。

              原位雜交技術(shù)(In situ hybridization,ISH)是分子生物學(xué)、組織化學(xué)及細(xì)胞學(xué)相結(jié)合而產(chǎn)生的一門新興技術(shù),始于20世紀(jì)60年代。

              原位PCR;原位雜交細(xì)胞定位和PCR的高靈敏度相結(jié)合的技術(shù),在細(xì)胞(爬片、甩片或涂片)或組織(石蠟、冰凍切片)上直接對靶基因片段進(jìn)行擴(kuò)增,通過摻入標(biāo)記基團(tuán)直接顯色或結(jié)合原位雜交進(jìn)行檢測的方法。


              根據(jù)不同的雜交實(shí)驗(yàn)要求,應(yīng)選擇不同的核酸探針。在大多數(shù)情況下,可以選擇克0隆的DNA或cDNA雙鏈探針。但是在有些情況下,必須選用其它類型的探針如寡核苷酸探針和RNA探針。例如,在檢測靶序列上的單個(gè)堿基改變時(shí)應(yīng)選用寡核苷酸探針,在檢測單鏈靶序列時(shí)應(yīng)選用與其互補(bǔ)的DNA單鏈探針(通過克0隆人M13噬菌體DNA獲得)或RNA探針,寡核苷酸探針也可。長的雙鏈DNA探針特異性較強(qiáng),適宜檢測復(fù)雜的靶核苷酸序列和病原體 ,但不適宜于組織原位雜交,因?yàn)樗灰淄高^細(xì)胞膜進(jìn)入胞內(nèi)或核內(nèi)。在這種情況下,寡核苷酸探針和短的PCR標(biāo)記探針(80~150bp)具有較大的優(yōu)越性。


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