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              原位雜交電話 武漢思特進公司

              發布時間:2021-05-30 10:08  

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              武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。近研究結果表明,寡核苷酸探針(16-30nt)能自由出入細菌和組織細胞壁,雜交效率明顯高于長探針,因此,寡核苷酸探針和不對稱PCR標記的小DNA探針或體外轉錄標記的RNA探針是組織原位雜交優選探針。





              熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)技術是在已有的性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非性DNA分子原位雜交技術?;驒z測定義基因檢測:指通過基因芯片等方法對被測者細胞中的DNA分子進行檢測,并分析被檢測者所含致病基因、疾病易感性基因等情況的一種技術。它利用熒光標記的核酸片段為探針,與染色體上或DNA顯微切片上的特異fl-N:~行雜交,通過熒光檢測系統(熒光顯微鏡)檢測信號DNA序列在染色體或DNA顯微切片上的目的DNA序列,進而確定其雜交位點。FISH技術檢測時間短,檢測靈敏度高,無污染,已廣泛應用于染色體的鑒定、基因定位和異常染色體檢測等領域。FISH是原位雜交技術大家族中的一員,因其所用探針被熒光物質標記(間接或直接)而得名,該方法在80年代末 被發明,現已從實驗室逐步進入臨床診斷領域。 基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火 溫度下復性;通過熒光顯微鏡觀察熒光信號可在不改變被分析對象(即維持其原位)的前提下對靶核酸進行分析。


              武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。結果被檢1128例羊水間期細胞FISH檢測均成功,其中檢出正常核型1081例,數目異常核型20例,與常規細胞染色體核型分析結果一致,另外27例結構異常FISH技術未能檢出。






              mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次FISH實驗中完成。預雜交1)每個管中置換成大約300ulHYB-溶液,60℃水浴5分鐘,避免振蕩。mFISH能同時檢測多個基因,分辨復雜的染色體易位和微小缺失,區分間期細胞多倍體和超二倍體等。mFISH用激發光譜和吸收光譜不同的熒光索按一定調色方法標記不同的探針,從而對不同靶DNA同時進行定位和分析,并能對不同探針在染色體上的位置進行排序。


              武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。



              目的探討熒光原位雜交(FISH)技術在檢測胎兒染色體異常的臨床應用。基本原理是熒光標記的核酸探針在變性后與已變性的靶核酸在退火溫度下復性。方法選用13、21、18、X、Y特異性探針對1128例孕16~22周有產前診斷指征的婦女羊水間期細胞進行分析,并與同時進行的羊水細胞培養核型分析結果進行對照。結果被檢1128例羊水間期細胞FISH檢測均成功,其中檢出正常核型1081例,數目異常核型20例,與常規細胞染色體核型分析結果一致,另外27例結構異常FISH技術未能檢出。結論 FISH技術檢測胎兒染色體數目異常具有快速、簡便、準確性高、特異性強等優點,有較大的臨床應用價值,并對產前細胞遺傳學診斷有重要意義。


              武漢思特進科技發展有限公司成立于2007年,是一家以實驗技術研發、實驗產品研發、日化產品研發、實驗項目承接為一體的高新技術公司;公司實驗中心有分子生物學平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產品生產平臺;可以開展各類動、植物、細菌、細胞等生物實驗。目前基因檢測的方法主要有:熒光定量PCR、基因芯片、液態生物芯片與微流控技術等。



              顯色以下各步均在室溫下進行。

              (1)緩沖液I洗1min。

              (2)用含2%正常羊和0.3%TritonX-100的緩沖液I孵育切片30min。

              (3)用含1%正常羊和0.3%TronX-100的緩沖液I稀釋羊抗Dig。

              (4)將稀釋液滴加在切片上,封口膜覆蓋,濕盒內4℃孵育過夜。

              (5)緩沖液I洗10min。

              (6)緩沖液Ⅱ洗10min。

              (7)加顯色液,封口膜覆蓋,避光室溫孵育2~20h,隨時鏡檢,當顯色滿意時入緩沖液Ⅲ終止顯色。

              顯色液臨用前配,其配方為:①NBT 45μl;②X-Phospllate液 35μl;③左旋咪唑      2.4mg;④緩沖液Ⅱ 加至10ml。

              (8)常規脫水、透明、封固。

              結果:雜交陽性信號為紫藍色顆粒。


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