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{微生物檢測}致病菌

——微生物檢測致病菌——

     致病菌即能夠引起人們發(fā)病的細(xì)菌。食品微生物限度概述微生物限度檢查應(yīng)在環(huán)境潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內(nèi)進(jìn)行。大腸菌群檢驗(yàn)呈陽性，并懷疑食品可能受到致病菌污染時可進(jìn)行致病菌檢驗(yàn)。在我國現(xiàn)有的國家標(biāo)準(zhǔn)中，致病菌一般指'腸道致病菌和致病性球菌'，主要包括沙門氏菌、志賀氏菌、金黃色葡萄qiu菌、致病性鏈球菌等四種，致病菌不允許在食品中檢出。

     對不同的食品和不同的場合，應(yīng)選擇一定的參考菌群進(jìn)行檢驗(yàn)。固質(zhì)培養(yǎng)：是將jun種接至疏松而富有營養(yǎng)的固體培養(yǎng)基中，在合適的條件下進(jìn)行微生物培養(yǎng)的方法。如海產(chǎn)品以副溶血性弧菌作為參考菌群，蛋與蛋制品以沙門氏菌菌、金黃色葡萄qiu菌、變形gan菌等作為參考菌群，米、面類食品以蠟樣芽孢gan菌、變形gan菌、霉菌等作為參考菌群，罐頭食品以耐熱性芽孢菌作為參考菌群等。

{微生物檢測}微生物分離純化

含有一種以上的微生物培養(yǎng)物稱為混和培養(yǎng)物(mixed culture)。2、細(xì)菌細(xì)胞在固體培養(yǎng)基表面形成的細(xì)胞群體叫菌落(colony)。如果在一個菌落中所有細(xì)胞均來自于一個親代細(xì)胞，那么這個菌落稱為純培養(yǎng)(pureculture)。在進(jìn)行junzhong鑒定時，所用的微生物一般均要求為純的培養(yǎng)物。得到純培養(yǎng)的過程稱為分離純化，方法有許多種。

1、傾注平板法

首先把微生物懸液通過一系列稀釋，取一定量的稀釋液與熔化好的保持在40-50℃左右的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基充分混合，然后把這混合液傾注到無菌的培養(yǎng)皿中，待凝固之后，把這平板倒置在恒箱中培養(yǎng)。40-2010食品安全標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)阪崎腸gan菌檢驗(yàn)GB4789。單一細(xì)胞經(jīng)過多次增殖后形成一個菌落，取單個菌落制成懸液，重復(fù)上述步驟數(shù)次，便可得到純培養(yǎng)物。

2、涂布平板法

首先把微生物懸液通過適當(dāng)?shù)南♂專∫欢康南♂屢悍旁跓o菌的已經(jīng)凝固的營養(yǎng)瓊脂平板上，然后用無菌的玻璃guadao把稀釋液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面上，經(jīng)恒溫培養(yǎng)便可以得到單個菌落。

3、平板劃線法

zui簡單的分離微生物的方法是平板劃線法。6、液體接種從固體培養(yǎng)基中將菌洗下，倒入液體培養(yǎng)基中，或者從液體培養(yǎng)物中，用移液管將菌液接至液體培養(yǎng)基中，或從液體培養(yǎng)物中將菌液移至固體培養(yǎng)基中，都可稱為液體接種。用無菌的接種環(huán)取培養(yǎng)物少許在平板上進(jìn)行劃線。劃線的方法很多，常見的比較容易出現(xiàn)單個菌落的劃線方法有斜線法、曲線法、方格法、fangshe法、四格法等。當(dāng)接種環(huán)在培養(yǎng)基表面上往后移動時，接種環(huán)上的菌液逐漸稀釋，后在所劃的線上分散著單個細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)，每一個細(xì)胞長成一個菌落。

抑菌效力

抑菌劑效力可能受試驗(yàn)用容器特征的影響，如容器的材質(zhì)、性狀、體積及封口的方式等。食源病原微生物可通過接觸物表面、水、土壤、空氣、排泄物、食物等媒介傳播，從而污染“從農(nóng)田到餐桌”的食物鏈任何環(huán)節(jié)。因此，只要供試品每個包裝容器的裝量足夠試驗(yàn)用，同時容器便于按無菌操作技術(shù)接入試驗(yàn)菌液、混合及取樣等，一般應(yīng)將試驗(yàn)菌直接接種于供試品原包裝容器中進(jìn)行貯存。若因供試品的性狀或每個容器裝量等因素需將供試品轉(zhuǎn)移至無菌容器時，該容器的材質(zhì)不得影響供試品的特性（如吸附作用），特別應(yīng)注意不得影響供試品的PH，PH對抑菌劑的活性影響很大，同時容器的口徑大小應(yīng)便于供試品的進(jìn)出及混勻。

2.薄膜過濾法

   除另有規(guī)定外，按計(jì)數(shù)方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法進(jìn)行供試液制備。三角燒瓶液體培養(yǎng)多數(shù)是通過搖床振蕩，使外界的空氣源源不斷地進(jìn)入瓶中。取相當(dāng)于1g、1ml或10c㎡供試品的供試液，若供試品所含的菌數(shù)較多時，可取適宜稀釋級的供試液，照方法適用性試驗(yàn)確認(rèn)的方法加至適量稀釋液中，立即過濾，沖洗，沖洗后取出濾膜，菌面朝上貼于胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基或沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基上培養(yǎng)。

   培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 培養(yǎng)條件和計(jì)數(shù)方法同平皿法，每張濾膜上的菌落數(shù)應(yīng)不超100cfu。

   菌數(shù)報告規(guī)則 以相當(dāng)于1g、1ml或10c㎡供試品的菌落數(shù)報告菌數(shù)；若濾膜上無菌落生長，以<1報告菌數(shù)（每張濾膜過濾1g、1ml或10c㎡供試品），或<1乘以zui低稀釋倍數(shù)的值報告菌數(shù)。