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發布時間:2021-01-11 09:55  
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低溫生物菌種的實驗器材
細菌、酵母菌,霉菌。肉膏蛋白胨斜面培養基,滅菌脫脂牛乳,滅菌水,化學純的液體石蠟,甘油,河沙,瘦黃土或紅土、鹽,干冰,95%酒精,10%鹽酸,無水氯化鈣。滅菌吸管,滅菌滴管,滅菌培養皿,管形安瓿管,淚滴形安瓿管(長頸球形底),40目與 100目篩子,油紙,濾紙條(0.5×1.2cm),干燥器,真空泵,真空壓力表,噴燈,L形五通管,冰箱,低溫冰箱(-30℃),液氮冷凍保藏器。
細菌一般在什么溫度下不能存活?
細菌一般在什么溫度下不能存活?高至100攝氏度以上,低至-20攝氏度以下。
細菌也對人類活動有很大的影響。一方面,細菌是許多疾病的病原體,砂眼等疾病都是由細菌所引發。
然而,人類也時常利用細菌,例如乳酪及酸奶和酒釀的制作、廢水的處理等,都與細菌有關。在生物科技領域中,細菌有也著廣泛的運用。
細菌早期是被荷蘭人列文虎克在一位從未刷過牙的老人牙垢上發現的,但那時的人們認為細菌是自然產生的。直到后來,巴斯德用鵝頸瓶實驗指出,細菌是由空氣中已有細菌產生的,而不是自行產生,并發明了“巴氏消毒法”,被后人譽為“微生物創始人。
低溫生物菌種知多少?
實驗室菌種的傳代保藏過程
1. 按菌種說明書要求復溶菌粉,轉種于適當的增菌培養基內(G1),復壯后轉接至平板上,并于適當溫度下培養適當時間,分離出單個純種菌落,此為第2代(G2)。
2. 菌種鑒定完成后,挑取純菌落制成濃菌懸液用于制備甘油冷凍管,同時挑取純菌落轉接斜面菌種作為工作用菌種。此時,保藏菌種為第2代,但工作用菌種則為第三代。
3. 將第2代菌種管冷凍保存,將工作用菌種于適當溫度下培養適當時間后可用于試驗。
4. 取一支冷凍保存的G2代菌種轉種于平板和斜面培養基上,平板上的菌種制成冷凍保藏管第三代(G3),斜面培養基經適當溫度下培養適當時間后用作工作用菌種(W3)。
5. 將第三代菌種(G3)冷凍或低溫保存,將生長、轉種后的G2菌種經滅菌處理后丟棄。
6. 當工作用菌種代數小于5時,可直接用上一代工作用菌種轉接下一代工作用菌種,如W3可直接轉接為W4。
7. 按上述程序操作,直至G4轉為W5為止,需重新開啟安瓿,再重復上述操作程序、保藏和使用菌種。
以上方法中,菌種被分為兩類。傳代用菌種和工作用菌種,傳代用菌種用于甘油冷凍管法保藏,工作用菌種用斜面低溫保藏法保藏。
實驗證明,甘油冷凍管的有效期至少為2年,但其主要適用于細菌(需氧)、酵母菌的傳代、保藏、真菌和芽孢類細菌則需應用其它方法。
生物有機肥產品生產菌種安全性分析
雖然目前生物有機肥產品生產菌種大多采用植物根際促生菌, 但近年來很多研究發現,芽孢菌屬和類芽孢菌個別菌株能產生菌素。 即便在菌種安全分級目錄中列為一級免做理學試驗的菌種, 如枯草芽孢菌、 多類芽孢菌、 地衣芽孢菌等個別菌株也檢測到部分溶血素基因, 潛在危害不容忽視。 因此, 開展生物有機肥產品生產菌種生物安全風險評價, 從源頭上把好菌種安全關是產品質量安全的首要保障。通過調研發現, 用于生物有機肥產品的部分生產菌種分類地位不明確, 甚至混亂, 難以從源頭上進行安全風險的初步識別 。 以常見生產菌種枯草芽孢菌為例, 實際上是一個表型相似的群體, 包括枯草芽孢菌、 地衣芽孢菌、 短小芽孢菌、解淀粉芽孢菌、 深褐 (萎縮) 芽孢菌、莫哈韋(莫杰夫) 芽孢菌、 死谷芽孢菌、 索諾拉沙漠芽孢菌、 特基拉芽孢菌、暹羅芽孢菌等 10個緣種。生產企業送檢的枯草芽孢菌生物有機肥產品, 經鑒定發現很多產品實際為解淀粉芽孢菌, 且許多菌株具有很強的溶血作用。通過對生產企業調研發現, 部分生產企業選擇分離于動物腸道的解淀粉芽孢菌作為產品生產用菌株, 該類菌種生產發酵周期短、 活菌數量高、 生產成本低, 但產品的應用功效不佳, 溶血風險大 , 建議慎用。而植物來源的解淀粉芽孢菌溶血風險小, 產品應用效果好, 推薦使用。